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第一部分益肾健脾方治疗少弱精子症的实验研究目的:本研究是利用具有生殖毒性的雷公藤多苷制备的少弱精子症小鼠模型为观察对象,治疗组予以益肾健脾方进行造模后干预治疗,而对照组(东维力组或称左卡尼汀组)予以目前较为公认的西药左卡尼汀口服液治疗,通过对治疗后实验小鼠精液常规、线粒体膜电位以及线粒体通透性转换孔等指标的检测,从不同的层次以及不同的角度来观察益肾健脾方对雷公藤多苷制备的小鼠少弱精子症的改善效果,运用现代科研理念来证实益肾健脾方对男性少弱精子症的改善效果,在实验数据上支持益肾健脾方对少弱精子症的治疗效果,为中医“益肾健脾法”治疗男性少弱精子症提供事实依据,为未来男性少弱精子症的治疗提供新的思路与方法,也为进一步的研究提供前期基础。方法:50只雄性白色BALB/c种属正常小鼠,每只小鼠体重约18-20g,适应性喂养5天后,随机分为5组,分别为正常组、模型组、对照组(东维力组或称左卡尼汀组)、中药低剂量组以及中药高剂量组。动物模型的制备:用去离子水配置后的雷公藤多苷悬浊液以8ml/kg/d量灌胃,每lml雷公藤多苷悬浊液中含雷公藤多苷5mg,约相当于人体用量的40倍,模型组、对照组(东维力组或称左卡尼汀组)、中药低剂量组以及中药高剂量组每只小鼠每天10时给予8ml/kg/d的雷公藤多苷悬浊液灌胃,为期30天;模型制备后,正常组:每日10时给予8ml/kg/d的去离子水灌胃,为期30天;模型组:每日10时给予8ml/kg/d的去离子水灌胃,为期30天;对照组(东维力组或称左卡尼汀组):每日10时给予8ml/kg/d的左卡尼汀口服液灌胃,为期30天;中药低剂量组:每日10时给予1.35g/kg/d的益肾健脾方中药灌胃,为期30天;中药高剂量组:每日10时给予2.70g/kg/d的益肾健脾方中药灌胃,为期30天。本实验期间,每周对小鼠进行1次称重,然后根据小鼠体重的增加来调整每组小鼠的给药剂量,给药量按药理实验方法学计算。30天的药物干预过程结束后处死实验小鼠,采集实验小鼠的精液,应用精液活力测试仪器检测小鼠精液活力;应用流式细胞仪以及荧光染色法检测小鼠精子线粒体膜电位的变化;应用流式细胞仪和荧光染色法检测小鼠精子线粒体通透性转换孔变化。结果:1小鼠的精液质量对照组(东维力组或称左卡尼汀组)、中药低剂量组以及中药高剂量组的A级精子百分率、A+B级精子百分率、精子总活力百分率以及精子浓度(叁×106/ml)较正常组有一定的差异,且差异具有统计学意义(P<0.05);对照组(东维力组或称左卡尼汀组)、中药低剂量组以及中药高剂量组对比模型组,A级精子百分率、A+B级精子百分率、精子总活力百分率以及精子浓度(×106/ml)有明显升高,差异明显,具有统计学意义(P<0.05);中药低剂量组以及中药高剂量组对比对照组(东维力组或称左卡尼汀组),A级精子百分率、A+B级精子百分率、精子总活力百分率以及精子浓度(×106/ml)有明显升高,差异明显,具有统计学意义(P<0.05);中药低剂量组对比中药高剂量组,差异不明显。2小鼠精子线粒体膜电位对照组(东维力组或称左卡尼汀组)、中药低剂量组以及中药高剂量组的小鼠精子线粒体膜电位较正常组有明显下降,差异明显,具有统计学意义(P<0.05);对照组(东维力组或称左卡尼汀组)、中药低剂量组以及中药高剂量组的小鼠精子线粒体膜电位较模型组有明显升高,差异明显,具有统计学意义(P<0.05);中药高剂量组以及中药低剂量组的小鼠精子线粒体膜电位较对照组(东维力组或称左卡尼汀组)有明显升高,差异明显,具有统计学意义(P<0.05);中药高剂量组的小鼠精子线粒体膜电位对比中药低剂量组小鼠精子线粒体膜电位有明显升高,差异明显,具有统计学意义(P<0.05)。3小鼠精子线粒体通透性转换孔对照组(东维力组或称左卡尼汀组)、中药低剂量组以及中药高剂量组的小鼠精子线粒体通透性转换孔较正常组有明显下降,差异明显,具有统计学意义(P<0.05);中药高剂量组、中药低剂量组、对照组(东维力组或称左卡尼汀组)的小鼠精子线粒体通透性转换孔较模型组有明显升高,差异明显,具有统计学意义(P<0.05);中药高剂量组以及中药低剂量组的小鼠精子线粒体通透性转换孔较对照组(东维力组或称左卡尼汀组)有明显升高,差异明显,具有统计学意义(P<0.05);中药高剂量组的小鼠精子线粒体通透性转换孔较中药低剂量组有明显升高,差异明显,具有统计学意义(P<0.05)。结论:1益肾健脾方能降低雷公藤多苷对小鼠精子线粒体膜电位损害,从而提高小鼠精子线粒体膜电位水平;2益肾健脾方能降低雷公藤多苷对小鼠精子线粒体通透性转换孔的损害,从而改善小鼠精子线粒体通透性转换孔通透性;3益肾健脾方能降低雷公藤多苷对小鼠精液活力的损害,从而提升小鼠精液的质量。第二部分益肾健脾方治疗少弱精子症的临床研究目的:本临床研究是以临床男性少弱精子症患者为研究对象,通过检测治疗前后精液常规的各个指标的改善效果,来观察益肾健脾方对男性少弱精子症的治疗效果。从临床的角度来观察益肾健脾方的治疗效果,与实验研究相结合,为将来少弱精子证型男性不育症的治疗提供新的思路。方法:本临床研究采用前后自身对照研究,观察周期为90天,病例观察数为32例,服用药物为东直门医院国际部药房提供的益肾健脾方颗粒药物,在治疗前后对患者各自进行一次精液常规检测,统计分析精液常规中A级精子活力、(A+B)级精子活力、精子总活力以及精子浓度等指标。每30天对所有患者进行一次随访,并询问患者配偶的怀孕情况,对临床疗效做出评价。结果:经治疗后,对所有参加研究的32例患者精液常规进行检测,经分析,治疗后患者的A级精子活力、(A+B)级精子活力、精子总活力以及精子浓度较治疗前有明显的提高,差异具有统计学意义(P值<0.01);本研究中共收集有效病例32例,根据临床疗效评价标准,治愈5例(15.6%),显效8例(25.0%),有效13例(40.6%),无效6例(18.8%),总有效率为(81.3%)。结论:益肾健脾方能明显改善脾肾亏虚型少弱精子症患者的精液质量。