前言 随着分子生物学技术的进展，端粒(telomere)和端粒酶(telomerase)成为当今国际生物医学界研究的热点之一，端粒酶是细胞分裂的基础、增殖的保证，与细胞衰老、凋亡、永生化及肿瘤发生发展密切相关。端粒酶是由端粒酶RNA和蛋白质组成的核糖核蛋白DNA聚合酶，它具有逆转录酶的活性，以自身RNA为模板合成端粒序列，补偿端粒的丢失，使细胞永生化。目前研究证明人端粒酶包括三个组成部分，即人端粒酶RNA组分hTR(human telomerase RNA component)，人端粒酶相关蛋白hTP1(human telomerase associated protein 1)和人端粒酶逆转录酶hTERT(human telomerase reverse transcriptase)。其中hTR和hTP1基因的表达与细胞端粒酶的活性并不完全一致。hTERT是端粒酶的催化亚单位，在端粒酶的激活中起关键作用，与端粒酶的活性密切相关。bcl-2基因是凋亡抑制基因，端粒酶与bcl-2的关系尚有争议，但大多数学者认为bcl-2调节端粒酶活性，bcl-2表达越强，端粒酶活性越强。成釉细胞瘤(Ameloblastoma，AB)中二者关系未见报道。 AB是最常见的牙源性肿瘤，国内发病率为牙源性肿瘤的59.3％，WHO1992年牙源性肿瘤重新分类中，把AB定为良性肿瘤，但由于其局部呈侵袭性生长，高复发，可恶变，可转移，有学者称之为交界性肿瘤。AB发病和复发的原因均不能被完全解释，且临床上常需手术治疗，切除颌骨破坏颜面外形，给患者带来极大痛苦，引起口腔外科及病理学界的广泛关注。同样牙源性角化囊肿(Odontogenic keratocyst，OKC)也为颌骨内常见最具侵袭性的囊肿，其生物学行为同样不甚清楚。本实验采用原位杂交的方法，检测AB和OKC hTERT和bcl-2的表达并进行比较和相关性分析，探讨端粒酶的调控机制，研究AB的细胞分化与其临床生物学行为的关系，为肿瘤的诊断、治疗和预后提供有力的理论依据。 材料与方法 原位杂交所用标本取自中国医科大学附属第一医院病理科1996－2001年存档蜡块，共收集成釉细胞瘤54例（原发31例，复发19例，恶变4例XOKC16例，正常口腔粘膜（牙龈、颊V例。免疫组化所用标本取自中国医科大学附属口腔医院和附属第一医院1987－2001年手术切除标本。AB75例（原发31例，复发37例，恶变7例XOKC35例，口腔正常粘膜（颊，牙龈户例。原位杂交法由北京大学医学部病理系提供。免疫组化法采用链霉素抗生物素蛋白一过氧化物酶法u－P法人结果判定：（）原位杂交：hTERT或h－2的胞浆中出现紫蓝色颗粒为阳性着色。＜5％计（－），5％－24％计（＋），25％－50％计（＋＋），＞50％计（＋＋十人 p）免疫组化企（按切片中细胞显色有无及深浅评分人对分为细胞无色J分为浅黄色；2分为棕黄色；3分为棕褐色。B（按切片中显色瘤细胞占切片中瘤细胞的比例评分＊ 1分为 25％以下；2分为 25％－75％；3分为 75％以上。每例积分一A X B，按积分高低分为：阴性（一人积分0分；弱阳性（＋X积分二一4分，强阳性（＋十人积分＞4分。统计方法采用SPSS10．0统计软件，进行x’检验和Ken3叨秩相关分析，P＜0．05具有统计学意义。 结 果 hTERT mRNA阳性表达部位在胞浆，7例正常口腔粘膜中，只有 1例上皮基底层为弱阳性。16例 OKC阳性率为 87．5％，表达的范围由基底层向副基底层细胞扩展，阳性以弱至中度阳性为主。54例AB中，阳性率为94．4％，阳性表达主要以中、高度为主，阳性部位主要位于外周柱状或立方状细胞及散在或密集增生的多边 ·2·形、梭形细胞中。AB刀KC与正常上皮的表达分组有显著差异河＜0．00人我们还把＊B按临床生物学行为分组（原发力例，复发19例，恶变4例人从表达趋势看伴随着AB的复发恶变，h TETE RTRTm＊＊A阳性率及表达强度增高河＜0．05人此外我们把AB中 hTERT mRNA的表达与其临床发生的年龄＼性别、部位，及组织病理学分型进行了统计学相关性分析，无显著统计学意义瞩＞0．05）。 bCI－2在47例AB的细胞浆及核膜上为强阳性表达／ 例为弱阳性，9例阴性。35例OKC12例为强阳性，14例为弱阳性，9例阴性。正常口腔粘膜4例在上皮基底层表达为弱阳性，5例为阴性。组间比较P＜0．001，具有显著统计学意义。另外伴随＊B复发恶变，bCI－2表达也随之变化，表达的例数及强度增加河＜0．of人按 AB发生的年龄、性别、部位、组织病理分型分组，bCI一二的表达与上述因素无明显相关性河＞o刀5人但h－2表达与肿瘤的细胞分化形式有关，在良性AB中部分瘤细胞的增生与分化呈异质性分布，同一肿瘤中细胞的分化是不同的，部分组织表现为滤泡型或丛状型，部分瘤细胞外周层消失，星网状层细胞密集增生呈片状或实体团块状，尤其是恶变的几例AB，伴随着肿瘤的这种变化其＊－2表达强度增强。但角化退变样细胞及颗粒样细胞却缺乏表达，这点与hTERT在AB中表达一致。同样OKC及正常口腔粘膜的阳性表达都在保持有旺盛增殖潜能的基底干细胞层，但相对来说例数少，?