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目的：通过缝隙连接通讯(gap junction intracellular communication, GJIC)增强剂前列腺素E2(Prostaglandin E2, PGE2)或GJIC减弱剂18a-甘草次酸(18α-Glycyrrhetinic acid,18α-GA)对脂肪细胞向成骨细胞横向分化的影响,探讨缝隙连接通讯对脂肪细胞与成骨细胞间横向分化的调控机制。方法：①选取3月龄新西兰大白兔腹股沟处脂肪组织,机械分离和酶消化法分离提取成熟脂肪细胞(Mature adipocytes, MA)。②采用天花板贴壁法(即培养瓶内充满培养基,翻转培养瓶使瓶底朝上)获得去分化脂肪细胞(Dedifferentiated adipocytes, DA),对DA进行传代培养。③取第三代去分化的脂肪细胞进行成骨诱导(成骨诱导剂：10%FBS的DMEM培养液,10mmol/Lp甘油磷酸钠,0.05mmol/L维生素C和100mmol/L地塞米松),加入GJIC增强剂PGE2设为增强组,加入GJIC减弱剂18α-GA设为减弱组,并设立对照组进行对比。MTT法绘制细胞生长曲线,计算倍增时间,观察PGE2和18α-GA对细胞倍增是否有影响。④成骨分化指标的检测：对诱导2周的三组细胞进行茜素红钙结节染色对成骨细胞定性检测；对诱导2周后的三组细胞进行I型胶原免疫组化染色对成骨细胞半定量检测。⑤缝隙连接指标的检测：Western blot(蛋白质印迹)技术检测缝隙连接蛋白43(Cx43)的表达；划痕标记染料示踪法(scrape-loading and dye transfer, SLDT)对各组细胞GJIC功能检测；透射电镜(transmission electron microscope, TEM)观察缝隙连接结构并测量缝隙连接的长度。结果：①原代成熟脂肪细胞呈现小圆形指环状,形态规则,呈聚集分布。②天花板贴壁法培养MA,在缺氧缺营养环境下,MA中脂滴逐渐由胞质内脱出,由圆形逐渐变成椭圆形,最终呈长梭形成纤维细胞状的DA。③MTT法绘制细胞的生长曲线,计算倍增时间,组间进行单因素方差分析P=0.982(P>0.05),差异无显著性意义,说明PGE2、18α-GA对去分化脂肪细胞生长增殖无显著影响。④成骨分化检测：茜素红对连续培养2周的三组细胞进行钙结节染色均发现紫红色结节；I型胶原免疫组化染色灰度值检测,χ±S分别是增强组115.804±8.476、对照组125.479±9.230、减弱组134.551±7.301,分别与对照组比较P值分别是0.046、0.047,均有统计学意义(p<0.05)。⑤透射电镜观察缝隙连接并测量其长度,χ±S分别是增强组2.705±0.109、对照组1.954±0.144、减弱组1.264±0.202,分别与对照组比较(P均=0)有统计学意义；SLDT法对各组细胞GJIC功能检测发现LY扩散层数增强组9-10层、对照组7-8层、减弱组4-5层；Western blot技术检测Cx43蛋白的表达,所得X光胶片用Chemi Imager5500V2.0软件扫描,通过Fluor Chen2.0软件进行定量分析,测得整合光密度值(integrated density value, IDV),x±S分别是增强组54826.69±1909.12、对照组48519.19±1678.50、减弱组44158.92±1356.94,分别与对照组比较P值分别是0和0.001,均有统计学意义(p<0.05)。结论：天花板贴壁法可以使成熟脂肪细胞去分化得到去分化脂肪细胞；去分化的脂肪细胞在成骨诱导环境下可以分化为成骨细胞；PGE2可以增强缝隙连接通讯以增强向成骨细胞分化的能力,18α-GA可以减弱缝隙连接通讯以减弱向成骨分化的能力。说明细胞间信号传导对细胞分化有一定影响。