本研究探索了5种葫芦科作物病毒即小西葫芦黄花叶病毒(Zuccini yellow mosaic virus，ZYMV)、西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus，WMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus，CMV)、番木瓜环斑病毒-西瓜株系(Papaya ringspot virus watermelon strain，PRSV-W)和南瓜花叶病毒(Squash mosaic virus，SqMV)的斑点杂交检测技术，为葫芦科作物种子带毒的快速准确鉴定、流行病学研究和转基因检测等提供技术和方法。以构建的重组质粒为模板，用PCR方法合成了相应的地高辛标记cDNA探针。通过斑点杂交检测西葫芦病叶汁液来考察探针的灵敏性和特异性。同时设计了3种不同长度的SqMV探针(0.55、1.6、2.7 kb)对杂交效果进行了研究。并用建立的方法检测了采自河南郑州、开封、海南三亚等不同地区不同年份的18份样本以及2007年采自郑州果树所根据3种症状类型分类的15份西葫芦样本，以考察本方法的实际应用效果。结果显示：ZYMV、WMV、CMV、PRSV-W和SqMV的5种探针检测各自侵染西葫芦病汁液的稀释低限分别为1：160、1：160、1：320、1：160、1：320，而每种探针与健康西葫芦和其它4种病毒的反应均为阴性：不同长度的SqMV探针杂交结果相同。得出结论：用PCR方法合成的地高辛标记的探针，能够直接在植物组织中将5种病毒检测出来，具有较好的灵敏性、特异性和重复性；探针的长度对杂交的灵敏性和特异性没有影响；用建立的检测方法能够将5种病毒在采集的样本中检测出来。