侧耳属真菌原生质体技术选育高产菌株研究

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食用菌产量与质量的提高,首先取决于有优良的菌种。我国是世界上侧耳属真菌(Pleurotus)最大的生产国,因此,深入细致地开展其良种选育工作是至关重要的。食用菌原生质体育种比传统的杂交育种具有明显的开拓性。本研究即以侧耳属的桃红侧耳、平4011、白灵侧耳为实验菌种,对其原生质体制备及再生的适宜条件进行了研究,同时进行了高产菌株的选育工作。结果表明,桃红侧耳和平4011原生质体得率和再生率均较高。只有白灵侧耳原生质体虽得率较高,但再生率很低。通过进一步研究影响其原生质体制备与再生的几个较为关键的因素表明:白灵侧耳用1%蜗牛酶与1%纤维素酶的混合酶液制备原生质体,酶解时间以2小时为宜;酶解温度28℃:适宜菌龄为5日龄;以0.6mol/L蔗糖配制酶解液和作为制备与再生渗稳剂均最优,再生率可达2.1%,比以甘露醇作为渗稳剂再生率提高近3倍。通过对桃红侧耳原生质体的制备及再生,分离出大量长速快、长势强的再生菌株,并经进一步筛选得到优良菌株H120和H247,不仅长速快,满袋早,而且其F3代生物学效率仍显著高于出发菌株,增产率达14.9~21.7%。对桃红侧耳原生质体再生菌株几种胞外多糖分解酶活性进行了监测,得出胞外纤维素酶活性的高低与菌丝长速之间呈一定的正相关。通过对平4011原生质体高产菌株的选育,获得基质分解能力发生改变的优良菌株P211,在添加玉米芯的栽培料中不仅长速快,满袋早,而且其生物学效率显著高于出发菌株,达13.1%。经过白灵侧耳原生质体再生菌株筛选,得到长速快、产量显著高于亲株的优良菌株B102;同时得到高产菌株B306,虽长速不突出,但产量高于亲株达极显著差异。经酯酶同工酶分析,所筛选的优良菌株与出发菌株同工酶谱存在差异,是不同于原出发菌株的变异菌株。
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