【摘 要】
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原发性肝癌(Primaryhepaticcarcinoma)又称肝癌,是世界范围内最常见的消化道恶性肿瘤,其中肝细胞癌(HepatocellularCarcinoma,HCC)约占肝癌的90%,传统的治疗方法效果欠佳。随着
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原发性肝癌(Primaryhepaticcarcinoma)又称肝癌,是世界范围内最常见的消化道恶性肿瘤,其中肝细胞癌(HepatocellularCarcinoma,HCC)约占肝癌的90%,传统的治疗方法效果欠佳。随着分子生物学的迅猛拓展,以及转基因技术的进步,基因治疗各种恶性肿瘤成为新的研究热点,但是如何使外源基因安全而稳定的在肝癌细胞内表达成为难题,即如何增强外源基因的靶向性成为亟待解决的问题。目的:以乙肝病毒衣壳(HBVE)为基因运载体,联合AFP启动子,观察通过上述二者的双重靶向作用是否可以使IL-2基因在肝癌细胞中靶向表达。方法:1.体外培养HepG2、L02、HepG2.2.15细胞;2.PEG8000浓缩法提取HBVE作为基因运载体;3.PCR法制备人AFP启动子-IL-2重组基因,瞬时转染HepG2细胞与L02细胞;4.RT-PCR观察IL-2mRNA表达;5.WesternBlot观察IL-2蛋白表达情况。结果:以HBVE为基因的运载体,包裹人AFP启动子-IL-2重组基因后转染HepG2细胞和L02细胞,RT-PCR和WesternBlot检测到HepG2细胞有IL-2的表达,而对照组L02细胞无IL-2的表达。结论:以HBVE为基因运载体,可以使AFP启动子驱动的IL-2基因在AFP阳性的肝癌细胞靶向表达,从而提高了外源基因导入肝癌细胞的安全性。
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