【摘 要】
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糖类作为涉及生命活动本质的重要生物大分子之一,参与几乎所有的生命过程,集诸多功能于一身,如:作为重要的生物信息分子,参与细胞内/细胞间的识别,具有多种生理及病理活性等。近年来,随着糖类结构和功能关系的深入,对于糖类的研究已成为生命科学领域的重要热点。但因其结构的复杂性和多样性,对它的分析检测一直存在很大的挑战性。目前,软电离质谱及质谱联用技术是分析糖类最为有效的方法之一;而质谱分析糖类化合物时,存
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糖类作为涉及生命活动本质的重要生物大分子之一,参与几乎所有的生命过程,集诸多功能于一身,如:作为重要的生物信息分子,参与细胞内/细胞间的识别,具有多种生理及病理活性等。近年来,随着糖类结构和功能关系的深入,对于糖类的研究已成为生命科学领域的重要热点。但因其结构的复杂性和多样性,对它的分析检测一直存在很大的挑战性。目前,软电离质谱及质谱联用技术是分析糖类最为有效的方法之一;而质谱分析糖类化合物时,存在三个关键问题:1.糖类化合物的离子化效率不高,直接影响了质谱分析灵敏度,2.离子化过程中产生的多形态离子([M+H]+、[M+Na]+、[M+K]+等)使得质谱更为复杂而影响分析的选择性和专一性,不利于定量分析,3.因为传统离子源(如:ESI)的耐盐性低,高盐背景样品无法进行分析。如能利用糖的碱金属离子加合特性,在高盐背景中进行离子化,将有利于糖类化合物的高灵敏度、高选择性的质谱分析。纸喷雾离子化是近年发展起来的最简单的敞开式质谱(AMS)离子源,具有抗干扰能力强、基质效应小、操作简便的特点。本文建立了高含量碱金属盐纸基上的糖类化合物的高选择性离子化方法,实现了糖和糖复合物的高选择性和高灵敏度质谱分析。主要研究内容如下:第一章绪论。综述了糖类的研究概况,包括糖类的分类结构、生物学意义和分析方法现状,以及糖类在质谱离子源中的离子化行为,同时,介绍了PS-MS的原理、应用现状及纸基的改性。第二章建立了糖类化合物在盐基纸上的高灵敏度离子化方法。以糖类的结构单元作为模型化合物,采用多种盐类金属离子负载纸基进行纸喷雾离子化,发现离子化过程中糖类化合物与碱金属离子形成特异性加和离子,且可以有效降低背景离子化信号。以系列单糖、低聚糖和糖苷作为对象,进一步证实了方法的适用性。第三章从结构特征的角度部分探究糖类化合物在高盐纸基上高选择性离子化的机理。选择多羟基化合物和含杂原子的糖环为结构模型,考察了羟基的距离,顺反位置和特定立体结构的影响。确定了杂原子对糖环上电子分布的影响,从而影响糖分子与碱金属离子亲和能力。第四章将碱金属盐负载纸基上的纸喷雾电离方法成功应用到中药、食品、生物样品复杂基质中糖类化合物的分析。成功分析中药党参中的糖,人参中的糖苷,蜂蜜中的蔗糖掺假,生物样品血液和尿液中的葡萄糖,并实现尿液中葡萄糖的快速定量分析。表明所建立的方法能在复杂基质中高选择性分析糖类化合物,具有高结构选择性和高抗干扰能力。
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