三羟异黄酮是一种植物雌激素,它广泛存在于各种植物性食品,特别是豆类及其制品。三羟异黄酮对人类有很多益处,可用于治疗癌症、改善绝经期症状、骨质疏松、心血管疾病等。但越来越多的研究发现三羟异黄酮对围产期胎儿有不良影响,以及婴儿大豆配方制剂中的三羟异黄酮对婴儿生长发育有不良影响。于是,科学家们开始研究三羟异黄酮对母体及其子代的毒性作用和早期的补给是否有长期益处。实验目的:以SD大鼠为研究对象,研究不同生里时期给予膳食三羟异黄酮对母鼠生殖及其子代发育生长的影响。实验方法:在研究三羟异黄酮对各期大鼠的影响时分为对照组,中剂量组,高剂量组,分别给予其含不同剂量相应的三羟异黄酮的饲料0,20,100mg/kg·d。研究大鼠早期影响的实验,干预从母鼠孕10天起到仔鼠13周龄。研究大鼠青春期影响的实验,干预从大鼠3周龄到其13周龄。研究大鼠成年期影响的实验,干预从大鼠9周龄到其13周龄。每天观察大鼠的死亡率和生殖率,每周观察其体重,摄食量,生殖器与肛门间距。仔鼠断奶后观察其阴道开放时间和睾丸下降时间。雌鼠血浆雌二醇水平和雄鼠血浆睾酮水平用放射免疫试剂盒测定。显微镜观察生殖器官的病理学改变。使用蛋白质印迹法(western blotting)及其分析软件进行蛋白定量。实验结果:1.从围产期起给予干预,与对照组比较,高剂量组母鼠产后14天开始体重和摄食量下降,血清雌二醇水平升高,子宫、卵巢重量无差别,病理切片未见异常,子宫、卵巢雌激素受体ER表达量升高;仔鼠发育至21天时,高剂量组21天死亡率升高,生殖器与直肠间距(AGD)减小,雌性幼鼠子宫、卵巢,雄性幼鼠睾丸称重减少,病理切片发现高剂量组雌幼鼠卵泡发育提前;雌性仔鼠体重和摄食量9周龄左右开始下降,阴道开放时间提前,雄性仔鼠体重和摄食量9周龄左右开始有所升高,睾丸下降时间未见提前;13周龄时,雌鼠血清雌二醇水平降低,病理切片示子宫腔扩大,子宫扩张,子宫、卵巢雌激素受体ER表达量降低;雄鼠血清睾酮水平升高。2.从青春期起给予干预,与对照组比较,9周龄时雌鼠血清雌二醇水平降低,雄鼠血清睾酮水平升高;13周龄时,雌鼠体重和摄食量下降,阴道开放提前,生殖器与直肠间距(AGD)减小,卵巢称重减少,病理切片示雌鼠子宫腔扩大,子宫扩张,血清雌二醇水平有所降低,子宫雌激素受体ER表达量降低,雄鼠摄食量10周龄左右有所升高,血清睾酮水平升高,但体重无明显升高,睾丸下降时间未见提前,睾丸称重无差别,病理切片未见异常。3.成年期给予干预,与对照组比较,雌鼠体重和摄食量有所下降,生殖器与直肠间距(AGD)减小,卵巢称重减少,子宫雌激素受体ER表达量降低;雄鼠体重和摄食量无明显变化,睾丸称重无差别。实验结论:1.围产期暴露三羟异黄酮对幼年大鼠的影响主要发挥雌激素样作用,促进幼鼠生殖器官的发育,但这种影响对其成年后生殖器官的功能是有害的。2.青春期暴露三羟异黄酮对雌性大鼠的生长发育影响大于雄性大鼠,而对大鼠体重和摄食量的影响主要在于其成年后。3.三羟异黄酮对正常成年雌鼠主要发挥抗雌激素作用,而对正常成年雄鼠的作用不明显,但若加大剂量则可能对其生殖系统产生影响。