肺肿瘤放射免疫显像的应用和核素放射治疗的实验研究

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肺腺癌LTEP-A2细胞与鳞癌LTEP-78细胞免疫Balb/c小鼠,用细胞融合法制备出抗肺癌的杂交瘤AM-7与SM-1。以杂交瘤制备出单克隆抗体。经检定AM-7与SM-1均为IgG1亚型,其对应的肿瘤抗原分别为分子量约130KD与60KD的蛋白质。等电聚焦电泳测得两种单抗的等电点分别为4.7与4.3,蛋白质条带呈典型的单克隆抗体特征分布。免疫细胞化学染色实验表明,两种单抗与各型肺癌细胞株均有良好的结合反应,而对其它组织类型肿瘤染色强度明显低于肺癌细胞。对各型肺癌病理切片染色分析表明,AM-7对肺腺癌、鳞癌、大细胞肺癌有较高的亲和力,SM-1对鳞癌、小细胞肺癌、大细胞肺癌有较强的结合能力。两种单抗混合使用,抗瘤谱增加,阳性率由单用的78.5%增至92%以上,但染色强度未见增加,或稍有下降。 完整单抗经四种蛋白酶消化成抗体片段。Ficin与Bromelain法得到F(ab’)2及Fab混合物,Papain与Pepsin得到较纯的F(ab’)2。Ficin、Bromelain、papain、pepsin法所得片段的产率分别为最大理论产率的77.6%、98.8%、78.5%和48.50%,Ficin法所得片段免疫活性最高,为完整抗体的66%。 单抗碘标记后,用Scatchard分析法测得AM-7与SM-1的Ka值分别为1.4×109L.tool-1与1.12×109L.mol-1,与肺癌细胞的结合率分别为37.2%与34.7%。 碘标记单抗在载瘤裸鼠的分布表明,两种单抗24小时的T/TNT比值,除血较低外,多在1.5以上,48小时在2.0~4.0之间,72小时更高。片段的分布与清除要比完整抗体快得多,同一时间点的摄取量要比IgG减少50%,而达到相似T/TNT值所需时间要快一倍。I-131标记抗体及片段在载瘤裸鼠的显像与分布情况相符,完整抗体在48~72小时,片段在24~36小时能清晰显示出肿瘤。 单抗经2-巯基乙醇还原后,用MDP直接法标记Tc-99m,标记率在90~99%之间。动物实验可得到清晰的肿瘤显像结果。纯化单抗热源试验合格后用于临床病人,两种单抗试用于21例肺癌患者阳性率为76%,非肺癌患者一例,结果为阴性。 Y-90比I-131有更强的杀伤力。用自制的Y-90发生器淋洗得到纯度很高的Y-90,单抗的标记率达75~86%。标记Bio-Rex 70树脂后,用选择性动脉插管法注入狗一个肝叶,杀伤效果非常显著,可考虑应用于临床肿瘤患者的治疗。
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