AtSCL26和AtSCL29在氮胁迫下对拟南芥根系发育的功能研究

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GRAS家族是植物中特有的转录因子家族,参与植物的生长发育及胁迫应答。AtSCL29和AtSCL26是拟南芥GRAS家族的两个成员,先前研究推测AtSCL29和AtSCL26可能和新型植物激素独脚金素内酯生物合成及氮信号应答途径相关。因此本课题着重研究AtSCL29和AtSCL26在氮胁迫条件下对拟南芥根系发育的研究,主要结果如下:1、生物信息学分析表明AtSCL29主要在根中表达,其次是花、叶及种子;而AtSCL26主要在花中表达,其次是根。进一步亚细胞定位分析表明AtSCL29主要在细胞核中分布,其次是细胞质和线粒体。AtSCL26除了分布在细胞质、线粒体和细胞核外,它还在细胞质膜上和细胞壁中分布。启动子材料pAtSCL26::GFP表明AtSCL26在幼苗期根中表达,具体位置是在主根和成熟侧根根冠两侧、主根伸长区、中柱和侧根原基中。2、在正常条件下,与野生型Col-0相比,AtSCL29和AtSCL26突变体和双突材料主根长度均没有显著性差别,AtSCL26过表达家系主根长度也没有体现出差别。而皿上生长8 d的AtSCL29过表达家系AtSCL290X-3和AtSCL290X-6幼苗的平均主根根长均比Col-0主根短,经t检验分析均存在极显著性差异。地上表型观察发现,AtSCL290X-3和AtSCL290X-6均比Col-0抽苔晚,且莲座叶边缘锯齿程度及莲座叶表面表皮毛的密度均比Col-0的高。3、在9.895 mM氮皿上培养体系下(低浓度氮商业化产品),AtSCL26突变体870和AtSCL29突变体29b与Col-0相比主根长度没有显著性差异。进一步降低氮浓度,在0mMNO3-皿上培养体系下AtSCL26突变体(360和600)、AtSCL29突变体29b、AtSCL26和AtSCL29双突变体600x29b及AtSCL26过表达材料与Col-0相比主根长度没有显著性差异;而AtSCL29过表达家系AtSCL290X-3和AtSCL290X-6与Col-0相比平均主根长度均变短,经t检验分析,AtSCL290X-3与Col-0主根长度之间存在极显著性差异。在0mM NO3-营养液培养体系下,AtSCL26突变体600与Col-0相比主根长度没有显著性差异。4、在0mM NO3-皿上培养体系下,Ws生态型背景的AtSCL26过表达材料fm-1与Ws相比主根平均长度没有显著性差异,而AtSCL29干涉材料835-1平均主根根长较Ws长,存在显著性差异。综上,Col-0背景的AtSCL26和AtSCL29单突变体和双突变体及AtSCL26过表达材料在正常和氮胁迫条件下与Col-0相比平均主根长度没有显著性差别,而AtSCL29过表达在正常条件下会对拟南芥的根系和叶的发育及抽苔产生影响,也一定程度上参与氮胁迫条件下根系的发育。而在Ws背景材料中,AtSCL26过表达在氮胁迫条件下对拟南芥主根的生长没有显著性影响,AtSCL29表达下调会促进氮胁迫条件下拟南芥主根的生长。
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