论文部分内容阅读
目的
测定补充不同剂量槲皮素后大鼠体内胆固醇水平的变化,探讨槲皮素影响胆固醇代谢的适宜剂量;探讨槲皮素影响胆固醇代谢的具体途径和相关生物学机制;为深入研究植物化学物生物学作用提供新的实验依据。
方法
1、以健康雄性Wistar大鼠为研究对象,实验组在AIN-93配方基础上分布添加0.1%、0.2%、0.4%和0.8%槲皮素,对照组为AIN-93配方饲料,每组动物10头,实验周期五周。实验结束时后,测定血液中和脏器组织中胆固醇含量。
2、实验结束最后三天,采用代谢笼,定量饲料摄入量,并收集3天粪便样品;最后,麻醉动物,行胆管插管,收集1h时间内的胆汁,测定胆汁和粪便中胆汁酸含量。
3、在上述实验的基础上,选择影响LDL-C水平显著的槲皮素剂量水平为干预组剂量,以AIN-93基础饲料为对照组,每组动物10头,实验周期五周。实验结束时,采集肝脏样品,测定与胆固醇代谢相关的关键酶活性及基因表达水平。
结果
1、对雄性Wistar大鼠补充不同剂量的槲皮素后,0.4%槲皮素剂量组血液中LDL-C浓度升高,且与对照组比较具有统计学意义(P<0.05),TC、TG和HDL-C浓度在各组中没有统计学差异。补充不同剂量的槲皮素后TC、FCH和CE含量在肝脏、肾脏、小肠(空肠)及心脏有所下降;但是在睾丸中表现为上升势。
2、槲皮素对粪便和胆汁的排出量并没有影响,但是适宜剂量槲皮素能够增加粪胆汁酸和总胆汁酸含量(P<0.05)。
3、与对照组相比,给Wistar大鼠膳食中补充0.4%剂量槲皮素,其肝脏中HMG-CoA还原酶活性无统计学差异,7α-羟化酶活性升高(P<0.05),ACAT活性比对照组降低(P<0.05);RT-PCR结果显示HMG-CoA还原酶、ACAT和LDL-R的mRNA表达水平均比对照组下调(P<0.05),CYP7A1和LXRα的mRNA表达水平与对照组之间没有差异。
结论
本实验研究发现,在AIN-93饲料配方基础上补充0.4%槲皮素5周对Wistar大鼠体内代谢模式具有显著影响,其中,外周血LDL-C水平出现显著升高,其可能机制是槲皮素可能影响LDL-R代谢途径的某个环节,从而抑制或减缓血液中LDL-C的廓清过程。补充一定剂量的槲皮素能够促进Wistar大鼠胆汁酸的排泄,其具体机制可能是升高与胆汁代谢相关的7α--羟化酶活性有关。另外,我们发现适宜剂量槲皮素具有影响胆固醇在体内组织中分布的作用,其可能机制与槲皮素能调节ACAT的活性及其mRNA表达有关。
测定补充不同剂量槲皮素后大鼠体内胆固醇水平的变化,探讨槲皮素影响胆固醇代谢的适宜剂量;探讨槲皮素影响胆固醇代谢的具体途径和相关生物学机制;为深入研究植物化学物生物学作用提供新的实验依据。
方法
1、以健康雄性Wistar大鼠为研究对象,实验组在AIN-93配方基础上分布添加0.1%、0.2%、0.4%和0.8%槲皮素,对照组为AIN-93配方饲料,每组动物10头,实验周期五周。实验结束时后,测定血液中和脏器组织中胆固醇含量。
2、实验结束最后三天,采用代谢笼,定量饲料摄入量,并收集3天粪便样品;最后,麻醉动物,行胆管插管,收集1h时间内的胆汁,测定胆汁和粪便中胆汁酸含量。
3、在上述实验的基础上,选择影响LDL-C水平显著的槲皮素剂量水平为干预组剂量,以AIN-93基础饲料为对照组,每组动物10头,实验周期五周。实验结束时,采集肝脏样品,测定与胆固醇代谢相关的关键酶活性及基因表达水平。
结果
1、对雄性Wistar大鼠补充不同剂量的槲皮素后,0.4%槲皮素剂量组血液中LDL-C浓度升高,且与对照组比较具有统计学意义(P<0.05),TC、TG和HDL-C浓度在各组中没有统计学差异。补充不同剂量的槲皮素后TC、FCH和CE含量在肝脏、肾脏、小肠(空肠)及心脏有所下降;但是在睾丸中表现为上升势。
2、槲皮素对粪便和胆汁的排出量并没有影响,但是适宜剂量槲皮素能够增加粪胆汁酸和总胆汁酸含量(P<0.05)。
3、与对照组相比,给Wistar大鼠膳食中补充0.4%剂量槲皮素,其肝脏中HMG-CoA还原酶活性无统计学差异,7α-羟化酶活性升高(P<0.05),ACAT活性比对照组降低(P<0.05);RT-PCR结果显示HMG-CoA还原酶、ACAT和LDL-R的mRNA表达水平均比对照组下调(P<0.05),CYP7A1和LXRα的mRNA表达水平与对照组之间没有差异。
结论
本实验研究发现,在AIN-93饲料配方基础上补充0.4%槲皮素5周对Wistar大鼠体内代谢模式具有显著影响,其中,外周血LDL-C水平出现显著升高,其可能机制是槲皮素可能影响LDL-R代谢途径的某个环节,从而抑制或减缓血液中LDL-C的廓清过程。补充一定剂量的槲皮素能够促进Wistar大鼠胆汁酸的排泄,其具体机制可能是升高与胆汁代谢相关的7α--羟化酶活性有关。另外,我们发现适宜剂量槲皮素具有影响胆固醇在体内组织中分布的作用,其可能机制与槲皮素能调节ACAT的活性及其mRNA表达有关。