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目的:本研究通过观察急性脑梗死患者血清中HIF-1α与VEGF、Caspase-3在急性期不同时间点的表达水平,分析三者与脑梗死的关系及相关性。 方法: 1、对象:2012年10月-2013年11月收入四川省人民医院神经内科住院的急性脑梗死患者及健康体检者。 2、分组:本实验设置2个组,实验组为急性脑梗死患者,共34例。对照组为健康体检者,共30例。实验组:既往无脑血管病史,此次发病时间在12h内,3d内头颅MRI证实为颈内动脉系统急性脑梗死患者。对照组:健康体检者,一般资料及实验室生化指标与急性脑梗死组具有可比性。 3、标本采集和检测:对照组与实验组均采肘静脉血(约2-3ml),对照组空腹采血1次,实验组采血6次,为发病后12h、1d、3d、5d、7d、10d,其中有10名患者住院时间超过14d,我们同时采集14d血液样本10例,所有标本均送四川省人民医院中心实验室离心,取上层血清于EP管标记后存于-80℃冰箱。采用夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测HIF-1α与VEGF、Caspase-3浓度。 4、实验组按体积分组:根据3d内头颅MRI结果计算梗死体积:4.1-10.0 cm3为中梗死组,低于4 cm3及高于10.0 cm3分别为小梗死组及大梗死组。 5、神经系统评分:在发病后12h、3d、7d、10d对实验组进行NIHSS评分。 6、统计数据:采用SPSS17.0统计分析软件处理数据,数据以均数±标准差((x)±s)表示。两变量差异分析采用t检验法,如实验组与对照组HIF-1α、VEGF、Caspase-3浓度水平差异;两变量以上差异分析运用单因素方差分析,如实验组不同时间点表达差异;两变量关联方向与程度运用双变量相关分析,如血清HIF-1α与NIHSS评分、VEGF与NIHSS评分、Caspase-3与NIHSS评分及HIF-1α、VEGF与Caspase-3三者之间的相关性。 结果: 1、HIF-1α的表达: (1)实验组血清HIF-1α在发病后12h即出现表达,逐渐上升至1d达到最高,后逐渐下降,10d时仍可检测到。发病后各时间点HIF-1α浓度高于对照组,有显著性差异(p<0.05)。 (2)实验组HIF-1α浓度1d时达高峰,较12h、3d、5d、7d、10d明显增高,与各时间点比较均有显著性差异(p<0.05)。 (3)实验组不同体积组血清HIF-1α浓度比较:大于10.0 cm3组较4-10 cm3组及小于4 cm3组比较统计学差异具有显著性(p<0.01),而4-10 cm3组与小于4 cm3组比较无统计学差异(p>0.05)。 (4)血清HIF-1α浓度和NIHSS评分之间不存在相关性(p<0.05)。 2、VEGF的表达: (1)实验组VEGF在发病后12h即出现表达,逐渐上升至7d达到最高,后逐渐下降,10d时仍可检测到。发病后各时间点VEGF浓度高于对照组,有显著性差异(p<0.05)。 (2)实验组VEGF浓度7d时达高峰,较12h、3d、5d、7d、10d明显增高,与各时间点比较均有显著性差异(p<0.05)。 (3)实验组不同体积组血清VEGF浓度比较:大于10.0 cm3组较4-10 cm3组及小于4 cm3组比较统计学差异具有显著性(p<0.01),而4-10 cm3组与小于4 cm3组比较无统计学差异(p>0.05)。 (4)血清VEGF浓度和NIHSS评分之间不存在相关性(p>0.05)。 3、Caspase-3的表达: (1)实验组Caspase-3在发病后12h即出现表达,逐渐上升至1d达到最高,后逐渐下降,10d时仍可检测到。发病后12h、1d、3d Caspase-3浓度高于对照组,有显著性差异(p<0.01),5d、7d、10d较对照组比较无统计学差异(p>0.05)。 (2)实验组Caspase-3浓度1d时达高峰,较3d、5d、7d、10d明显增高,均有统计学差异(p<0.05)。 (3)实验组不同体积组血清Caspase-3浓度比较:大于10.0 cm3组较4-10 cm3组及小于4 cm3组比较统计学差异具有显著性(p<0.01),而4~10 cm3组与小于4 cm3组在1d、3d、5d、7d、10d比较有统计学差异(p<0.05)。 (4)血清Caspase-3浓度和NIHSS评分之间不存在相关性(p>0.05)。4、实验组血清HIF-1α与VEGF浓度表达的相关性分析统计结果r=0.681,p=0.000,提示血清HIF-1α与VEGF浓度表达呈正相关;血清HIF-1α与Caspase-3浓度表达的相关性分析统计结果r=-1.39,p=0.464,提示血清HIF-1α与Caspase-3浓度表达无相关性;血清VEGF与Caspase-3浓度表达的相关性分析统计结果r=0.230,p=0.221,提示血清VEGF与Caspase-3浓度表达无相关性。 结论: 1、脑梗死急性期低氧触发一系列低氧应答因子产生,HIF-1α参与了低氧应答反应,可能具有一定的神经保护作用。 2、VEGF参与急性脑梗死后血管修复及重建的病理生理过程,可能具有脑保护作用。 3、Caspase-3参与脑梗死急性期过程,以损伤作用为主。急性期之后随着梗死灶的自身的修复其表达水平逐渐下降至正常水平,可能是脑损伤的一个指标。 4、HIF-1α和VEGF呈正相关,低氧诱导HIF-1α产生后,可诱导其靶基因VEGF高表达,可能共同发挥减轻缺血缺氧后脑损伤的作用。HIF-1α与Caspase-3、VEGF与Caspase-3之间无相关性。 5、HIF-1α、VEGF与Caspase-3表达量与脑梗死体积密切相关,可能对临床判断脑梗死病情严重程度及其预后有一定的指导意义。 6、血清VEGF、HIF-1α与Caspase-3浓度和NIHSS评分之间不存在相关性,提示血清VEGF、HIF-1α与Caspase-3也许都不能作为评估急性脑梗死患者神经功能康复预后的指标。