拟南芥类受体激酶LRR-RLKs基因家族超表达植株筛选以及TRR1和TRR2的功能研究

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植物类受体激酶(RLKs, receptor-like kinases)是一类重要的蛋白激酶,参与植物生长发育调控的许多过程。在模式植物拟南芥中,有600多个RLKs.其中富含亮氨酸重复序列类受体激酶(LRR-RLKs)家族有223个成员,是最大的一个亚家族。它们定位于细胞膜上,有三个结构域:一个胞外结构域、一个胞内结构域以及一个单次跨膜结构域。到目前为止,只有其中少数基因的功能被阐释,如BRI1、BAK1、FLS2、EFR、SERKs、EMS1等。为了揭示其余LRR-RLKs的功能,本实验室在前期的研究工作中构建了180多个LRR-RLKs的超表达载体,并转入野生型拟南芥中,本研究在此基础上对这些超表达转基因植株进行鉴定,成功获得了102个LRR-RLKs的稳定表达转基因植株,并对它们的表型进行了观察研究。在鉴定LRR-RLKs的转基因植株过程中,发现其中两个同源基因TRR1(Tapetum Related RLK1)和TRR2的超表达植株与野生型相比,叶片更狭长、更短。对T-DNA插入缺失双突变体trr1trr2的研究发现,trr1trr2的绒毡层细胞膨大,但一部分小孢子母细胞可以正常发育形成可育的花粉粒,植株产生正常种子;更严重的表型是小孢子母细胞不能正常发育形成小孢子,花药塌陷造成植株的败育。这两种表型经常出现在同一个花药上,一侧药室的小孢子母细胞不能形成正常花粉,而另一侧药室的绒毡层细胞膨大。进一步研究发现,双突变体的小孢子母细胞不正常增殖、绒毡层开始变大,分别发生在花药发育的第6期和第9期。RT-PCR结果显示,与野生型相比,在trrl trr2中,绒毡层早期、中期和后期发育相关的基因SPL、DYT1和MS2的表达量分别被上调。酵母双杂交结果表明,TRRl和TRR2可能参与了SERKs等受体激酶所调控的花药发育信号途径。
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