肝癌组织cDNA消减文库的构建及相关基因的初步筛选

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肝癌(Hepatocarcinoma)是恶性程度极高的恶性肿瘤,在中国居于肿瘤死亡率第二位.肝癌的发生和发展是多基因多阶段进行的,因此分离肝癌相关基因是研究肝癌发生机制和发展过程所必需的手段.该文库包含了1800多个cDNA克隆,挑取该文库的克隆提取质粒作为模板,进行插入片段的PCR扩增,在绝大部分克隆中均可扩增出单一条带.对PCR产物进行点杂交初步筛选,表明非特异的cDNA被有效地消减掉,特异表达的cDNA得到富集.对差异表达基因进行初步测序分析,表明该文库包含有大量的肝癌相关基因,重复率很低,并包含有少量的新基因序列.利用该文库制作基因芯片,可从整体上研究肝癌的发生、发展机制,并可以研究肝癌的药物作用规律,为进一步筛选肝癌特异表达的未知新基因奠定了基础.
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