【摘 要】
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目的:在人胃癌SGC-7901细胞中明确ATG3是否诱导自噬的发生,并探究自噬与紫杉醇抗肿瘤作用之间相关关系。方法:1、构建慢病毒介导的自噬关键基因ATG3过表达及空载体(GFP)人胃癌SGC-7901细胞株,通过Western Blot检测自噬相关蛋白LC3-II,明确慢病毒介导的自噬关键基因ATG3过表达是否诱导人胃癌SGC-7901细胞株自噬发生。2、选取不同浓度的紫杉醇处理人胃癌SGC-7
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目的:在人胃癌SGC-7901细胞中明确ATG3是否诱导自噬的发生,并探究自噬与紫杉醇抗肿瘤作用之间相关关系。方法:1、构建慢病毒介导的自噬关键基因ATG3过表达及空载体(GFP)人胃癌SGC-7901细胞株,通过Western Blot检测自噬相关蛋白LC3-II,明确慢病毒介导的自噬关键基因ATG3过表达是否诱导人胃癌SGC-7901细胞株自噬发生。2、选取不同浓度的紫杉醇处理人胃癌SGC-7901细胞24小时后,通过MTT法观察细胞增殖情况、流式细胞术观察细胞凋亡情况及Western Blot检测凋亡相关蛋白PARP、c-PARP的表达情况,明确紫杉醇是否促进SGC-7901细胞的凋亡,进而探讨是否有抗肿瘤的功效。3、紫杉醇分别处理ATG3过表达及空载体SGC-7901细胞株,通过Western Blot分组检测自噬相关蛋白LC3-II及凋亡蛋白c-PARP的蛋白含量,进而探讨ATG3诱导的细胞自噬是否有抵抗紫杉醇的抗肿瘤效果。结果:1、ATG3过表达的SGC-7901细胞株,在WB的检测中其自噬蛋白LC3-II表达增多。具有统计学差异。2、紫杉醇处理人胃癌细胞SGC-7901细胞株,随着药物浓度的增加,MTT检测其增值率越低,流式细胞术提示药物浓度越高,其凋亡率越高,WB检测凋亡蛋白随着浓度增高,PARP逐渐下降,c-PARP逐渐增多,具有统计学差异。3、ATG3高表达组较空白对照组,其LC3-II表达增多,紫杉醇组较空白对照组,其凋亡蛋白c-PARP表达增多,ATG3高表达联合紫杉醇组提示凋亡蛋白较紫杉醇组c-PARP表达减少。具有统计学差异。结论:1.过表达ATG3能诱导人胃癌SGC-7901细胞发生自噬。2、紫杉醇能促进人胃癌SGC-7901细胞凋亡的发生,发挥抗肿瘤作用。3、ATG3可能通过诱导人胃癌SGC-7901细胞自噬抵抗紫杉醇的抗肿瘤作用。
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