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流行性感冒是最常见的急性病毒性疾病之一,病患者会出现不同的程度的全身性症状如轻度疲劳、呼吸衰竭、甚至死亡。大约10-20%世界人口受季节性流感影响,每年导致250,000-500,000人死亡。乙型流感病毒是引起季节性流感的局部爆发的主要病原体之一。儿童感染乙型流感病毒,接受阿司匹林治疗后可能会产生一种罕见的Reye’s,综合症,对大脑和肝脏均有严重影响。目前在预防和治疗乙型流感病毒感染方面,医药界已经付出很多努力。抗病毒药物,如神经氨酸酶抑制剂,被广泛用于治疗流感。然而,乙型流感病毒对这些药物日益具有耐药性。虽然接种疫苗可以提供保护作用,但是现有的疫苗几乎没有治疗方面的效果。近年来,人们基于被动免疫治疗的原理,制备特异性卵黄抗体(IgY)代替抗生素治疗病原菌和病毒引起的多种疾病,具有安全、无耐药性和成本低廉等优点。本研究以灭活乙型流感病毒免疫产卵母鸡,PEG沉淀法和硫酸铵盐析分离纯化特异性IgY抗体。然后通过SDS-PAGE、ELISA分析抗体纯度和效价；以琼脂扩散法和Western blot检测IgY对病毒颗粒及其功能蛋白的特异性反应；以血凝抑制试验和病毒空斑减数试验研究其体外抗病毒活性；通过动物实验研究其体内抗病毒活性。此外,本研究还制备了IgY抗体量子点探针,进行乙型流感病毒检测方面的探索。结果表明,首次免疫两周后,鸡卵黄中即可检测到抗体效价；初次免疫5周后效价逐步上升到峰值1：3200。经两步PEG沉淀提取和硫酸铵盐析纯化,每毫升卵黄可获得5.2mg IgY,纯度为98.2%；琼脂扩散试验和Western blot表明制备的特异性IgY不但能够沉淀病毒颗粒,而且对病毒膜蛋白神经氨酸酶和血凝素及其亚基均有特异性反应。体外抗病毒试验显示,IgY抗体血凝抑制效价为1：128,对活病毒的半数抑制浓度达到1.68mg/mL。动物试验证明,特异性IgY抗体能够清除攻毒小鼠肺部病毒从而降低病毒滴度及减轻病症。IgY量子点探针检测病毒结果表明,病毒蛋白含量与荧光强度之间存在线性关系,最低检测病毒浓度为2.834×10-7mg/mL。综上,本研究成功研制了高纯度和特异性的抗乙型流感病毒IgY抗体,该抗体在体内外均有抗病毒活性,在免疫诊断检测中有较高灵敏度。为IgY抗体作为抗流感药物和诊断试剂的应用开发奠定了基础。