突变红褐色貉MC1R基因的单核甘酸多态性的检测

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红褐色貉是一种新的乌苏里貉变异毛色貉,其毛尖为红褐色、白底绒毛色,且其眼睛和吻均为粉红色。经遗传分析初步确定这种新突变毛色为显性杂合基因控制。本研究旨在通过红褐色貉的促黑素细胞激素受体(MC1R)基因检测来探讨这种新突变毛色的遗传基础。   MC1R称促黑素细胞激素受体,是一种由317个氨基酸构成的肽类物质,属于G-蛋白偶联受体,具有7次跨膜结构。该受体可与内源配体促黑激素或Ag-outi蛋白相结合,在哺乳类动物黑色素细胞合成黑色素的过程中起到重要的调节作用,对决定动物毛色具有重要意义。本研究根据根据狗MC1R基因的DNA序列(GenBank登录号:AF064455)设计引物,对红褐色貉和普通毛色的乌苏里貉基因组DNA进行PCR扩增,得到目的片段,目的片段经纯化后克隆到pUCm-T载体,挑取4个阳性克隆进行序列测定。通过对红褐色貉与野生型貉的MC1R基因测序比较,检测到了两个变异位点:分别在486bp处编码第53位的亮氨酸的第三密码子突变,由G突变为C,属于同义突变;第2个突变位点在785bp处编码第149位的亮氨酸的第二密码子突变,由A突变为T,属于错义突变,氨基酸变为谷氨酸;可以把这两个突变位点作为与红褐色毛色性状有关基因紧密连锁SNP标记,推测MC1R基因存在红褐色毛色性状相关的功能突变位点;在MC1R基因486bp处酶切后,结果显示:红褐色貉为AB基因型,野生型的乌苏里貉为BB型;推测A等位基因可能参与控制毛色的红褐色表型, B等位基因可能参与控制野生型毛色(青灰色或青黄色)表型。
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