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目的 E选择素(E-selectin)是一种糖蛋白,属于粘附分子的选择素家族,仅表达于活化的血管内皮细胞,在炎症因子等血管内皮微环境改变的作用下表达增强,介导白细胞与内皮细胞的粘附,从而继发白细胞穿透、浸润至细胞外间质,最终发生内皮损伤。 胰岛素抵抗(IR)是指超过正常量的胰岛素始能在胰岛素效应器官产生正常的生理效应,存在于2型糖尿病(2-DM)诊断及之前多年,与2-DM存在因果关系。是多危险丛集综合征如代谢综合征的关键代谢异常,与病人增加的心血管危险性相关。回顾文献,研究大多集中在E-selectin等粘附分子与2-DM及2-DM有无血管并发症的关系的讨论上,并且明确2-DM病人E-selectin水平增加。也有文献表明E-selectin在糖耐量减低(IGT)、妊娠糖尿病(GDM)、原发性高血压、高甘油三酯血症时均有高表达,这些不同的临床病症的共同特征即IR,那么,是否E-selectin与IR有关呢,本实验建立了IR动物模型,就E-selectin与IR的关系进行了讨论。 对象与方法 1.IR大鼠模型的建造 选取60只雄性成年Wistar大鼠(体重≦250克),实验前适应性饲养7天,均自由取食饮水。暗夜周期为12h,室温控制在(23±2)℃。随机分成三组,每组20只,分别作为高脂饮食组、高糖饮食组(实验组),正常饮食组(对照组)。实验组大鼠分别饲高脂饮食、高糖饮食(果糖)。保证三组大鼠摄人热卡相等,为311梦天,但食物构成比例不同,蛋白质、脂肪、碳水化合物热比在高脂饮食组、高糖饮食组及正常组分别为21%,59%,20%;21%,10%,69%;20%,30%,50%。喂养过程中,每天收集并计算实验组大鼠溢出饲料盒外的饲料重量,并在第二天常规饲料的基础上予以等量补充。每隔3一4天配制一次新鲜饲料,于4℃冰箱中保存。每周监测三组大鼠血糖及体重。四周后从各组分别随机抽取5只大鼠行正葡萄糖钳夹实验。 2.we~一Blot法测定E一selectin,经取材,离心,蛋白定量,电泳,转膜,与抗体孵育,显像,E一selec血表达量的灰度分析。化学发光法测HNS、FPG、TG、TC、FFA浓度。电镜观察血管内皮形态学变化。采用SPSSIO.O软件包进行数据分析,钳夹实验组组间GIR均数采用单因素方差分析,取材实验组组间各变量的均数采用单因素方差分析,E一selectin表达量与TC、TG、FFA、即G、FINs、HoMA一%s间做直线相关分析。结果 1.单因素方差分析示:E一selec血灰度值在高脂饮食诱导组及高糖饮食诱导组显著高于正常对照组(P均<Q .01),高脂饮食诱导组高于高糖饮食诱导组(P<0 .05)。 2.相关分析结果示:高脂饮食诱导组、高糖饮食诱导组E一se-leetin灰度值与TG、FFA、FINs、HOMA一%S(10910)显著正相关(高脂组r二0.559,o·545,0.526,0.639;p=0.030,0.036,0.以4,0,010,高糖组r二0.575,0.538,0.562,0.650;p二0.025,0.038,0.029,0. 009),其中与HOMA一%S(10910)相关性最强。与即G、Tc无相关关系。 3.血管内皮电镜可见内皮损伤性改变。结论 E一seleetin表达水平与IR程度相关。E一seleetin可能成为现存或将来发展为2一DM的诊断标志物。