论文部分内容阅读
葛仙米学.名Nostoc sphaeroids.kütz,是一种多.细胞丝.状蓝藻,具有明.目、清热、利.肠等多种功效。近年来,随着人工培养技术已趋于完善,葛仙米越来越多地被运用于食品、保健品和化妆品中。多糖是葛.仙米中主.要活性成分,但.对其多糖.含量的测定方.法、结构特征.和生.物活性.还缺.乏研究,因此建立葛仙米多糖的显色法和HPLC测定方法,同时对葛仙米多糖进行分离纯化和结构分析,并探.究葛仙米多糖的.保湿性及免.疫调节作用,主要结果.如下:对苯酚-硫酸法测葛仙米中多糖方法进行优化,葛仙米多糖提取最优工艺条件为:料液比1:.500、温度100℃、提.取时.间6 h,采用.苯酚硫.酸法测定多糖.含量为32.65%;方法学.考察显示该方.法加样回.收率好,稳定.性好,精密.度高。用HPLC对葛仙米中多糖进行含量测定,结果发现采用TSK-Gel G6000 PWXL后,大分子量多糖可以有效分离。标准品.在0.156255 mg/mL范.围内多糖.含量与峰面.积呈良好的线性.关系;HPLC.测定葛仙米.水提液中多糖.含量的.精密度、重复.性和稳定.性的RSD分别.为1.59%、1.1.3%、2.5.6%,平均.加样回收.率为97.8%、RSD是1.72%,该方法灵敏度高、重复.性和稳定.性.较好,实验结.果可靠,所建.方法适.用于葛仙米中大.分子多.糖含.量的测定。葛仙米通过分级醇沉纯化葛仙米多糖,并通过反复醇沉纯化,获得葛仙米均一多糖NSKP40（40%醇沉）。重均分子量Mw为1.31×105 Da,由半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、葡萄糖醛酸组成。对葛仙.米多糖进.行糖醛酸还.原、傅里叶.变换红外吸.收光谱（FTIR）、甲基.化、核磁共.振波谱（NMR）分析,结.果表明,NSKP40（40%醇沉）主要由Terminal-Gal-、Terminal-GlcA-、-4-Man-1→、-4-Xyl-1→、-3,4-Glc-1→、-4,6-Glc-1→六种糖残基构成,其化学结构为:用MCR-302旋转流变仪探讨葛仙米多糖流变学特性发现,葛仙米多糖是典型的假塑性流体,其表观黏度受温度、浓度、pH、盐离子浓度、抗氧化剂、氧化剂的影响。多糖的表观黏度随质量浓度的增大而增加;在2080℃内,溶液黏度随着温度的升高而降低;pH=7时的溶液黏度最大;VC和H2O2可以降低多糖溶液的黏度,但下降幅度与VC浓度无关;葛仙米多糖的动态黏弹性显示,在扫描频率0.110Hz内,储能模量（G′）和损耗模量（G′′）随葛仙米多糖溶液质量浓度的增加而增大。此外,葛仙米多糖与透明质酸具有协效性。葛仙米多.糖在不同.相对湿度（43%和.81%）的条.件下,具有.吸湿保.湿性,且大分子量.葛仙米.多糖的保.湿率优.于透明质酸。与LPS刺激对照组相比,葛仙米多糖可以刺激模型细胞的NO释放量,且多糖在低浓度50μg/mL就表现出一定的免疫活性。因此,葛仙米.多糖可以通.过抑制巨噬.细胞模型.的NO分泌,产.生免疫调节.生物活性。