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1背景食管癌是世界上最常见的六大恶性肿瘤之一。河南省林州市（原林县）及其毗邻的辉县，安阳等地是我国，也是世界上食管癌发病率和死亡率最高的地区。但是，目前该地区人群食管癌的发生率和死亡率仍未得到根本改善，仍然是该地区人群肿瘤相关的主要死亡原因。造成这一状况的原因如下：对食管癌的确切发病因素尚不十分清楚，缺乏有效的预防手段和措施，用于食管癌早期诊断和人群筛查的手段有限，早期食管癌变的分子机制尚不清楚，缺乏敏感、特异的早期诊断和生物防治的指标和方法。最近研究认为，RASSF1A（RAS相关区域家族1A）基因是一种新的候选肿瘤抑制基因。许多肿瘤（肺癌，肝癌，鼻咽癌等）RASSF1A甲基化是一个频发的分子事件。此外，研究还发现某些发生RASSF1A甲基化的癌前病变患者，后被证实最终发展成癌（乳腺，肺）。曾报道日本、香港RASSF1A甲基化和食管癌病理变化的关系，但是报道结果和乳腺癌、肺癌相反。尚没有人报道食管癌高发区RASSF1A甲基化的情况。本研究旨在通过阐明河南食管癌高发区林州食管癌组织RASSF1A甲基化及其与临床病理变化的关系，进而阐明食管癌变的分子机制。2材料与方法本研究中79例食管癌患者手术切除大体标本均来自食管癌高发区河南省林州市姚村食管癌医院，男45例，平均年龄59±10岁，女34例，平均年龄60±9岁，另外对应的20例食管癌癌旁正常病例，男12例，平均年龄61±9岁，女8例，平均年龄59±9岁。所有患者术前均未接受放疗或化疗，术后病理证实均为食管鳞癌或癌旁正常组织，并记录食管鳞癌的临床病理学变化，包括癌肿部位、淋巴结转移、肿瘤分期、大体分型（溃疡型、蕈伞型、髓质型、缩窄型、腔内型）、分化程度。使用Gentral公司DNA提取试剂盒从肿瘤组织和癌旁正常组织中提取DNA。用CHEMICON公司的CpGenomeTM DNA Modification Kit（S7820）试剂盒进行修饰，用甲基化特异性PCR（MSP）检测RASSF1A甲基化。所有数据用SPSS13.0软件包进行处理，检验水准为双侧α=0.05。3结果3．1食管鳞癌患者癌组织及同一个体癌旁正常组织RASSF1A甲基化变化79例食管鳞癌组织RASSF1A基因启动子区甲基化阳性率（67％，53／79），明显高于癌旁正常组织（3／20，15％），P＜0.05。20例同一个体的癌组织和癌旁正常组织甲基化检测发现，仅3例同时出现甲基化，一致率为15％；有10例同时出现未甲基化，一致率为50％；总一致率65％；而癌组织甲基化阳性率明显高于同一个体癌旁正常组织（50％，10／20 vs．15％，3／20），P＜0.05，两组比较差异有统计学意义。3．2食管鳞癌RASSF1A甲基化与临床病理变化的关系低分化鳞癌的RASSF1A甲基化阳性率（19／21，90％）明显高于高分化鳞癌（21／29，72％）和中分化鳞癌（45％，13／29），P＜0.05。中年组（41-59岁）RASSF1A甲基化阳性率（31／37，84％）明显高于青年组（≤40岁，1／3，33％）和老年组（≥60岁，21／39，54％），P＜0.05。各种大体分型RASSF1A甲基化阳性率分别为溃疡型（10／15，67％）、蕈伞型（14／22，64％）、髓质型（13／23，57％）、缩窄型（10／13，77％）、腔内型（6／6，100％），P＞0.05，差异没有统计学意义。肿瘤分期、淋巴结转移、性别、癌肿部位和RASSF1A甲基化无关（P＞0.05）。4结论4．1 RASSF1A甲基化在食管鳞癌和对应的癌旁正常组织有较高的一致率（65％），提示RASSF1A甲基化是食管癌变的早期分子事件之一，可能是高危人群筛查的生物标记。4．2 RASSF1A甲基化与年龄、分化程度具有相关性，提示RASSF1A基因可能是食管鳞癌的一个预后指标。