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目的将已构建好的腺病毒真核表达载体Ad-CMV-BMP-14-IRES-hrGFP-1转染兔脂肪干细胞(ADSCs)后与软骨细胞进行共培养，与单独Ad-CMV-BMP-14-IRES-hrGFP-1转染ADSCs及单纯ADSCs与软骨细胞共培养后的成软骨效应进行比较，探讨BMP-14与软骨细胞在诱导ADSCs向软骨细胞分化过程中是否具有协同作用，用于优化软骨种子细胞来源。方法1、体外取兔关节软骨分离、培养软骨细胞；取兔皮下脂肪组织分离、培养ADSCs。2、对皮下脂肪组织分离、培养出的细胞进行鉴定，以判断其是否为ADSCs。将细胞向成骨、成软骨、成脂三个方向诱导，并分别行茜素红染色、阿利新蓝染色、油红O染色对诱导结果进行鉴定。3、观察腺病毒真核表达载体Ad-CMV-BMP-14-IRES-hrGFP-1转染ADSCs的最佳感染复数（MOI），并以其最佳MOI转染ADSCs。4、共培养模型建立与分组：共培养模型我们采用Transwell小室，将ADSCs以3×10~4个/mL密度接种于Transwell小室膜内膜上，软骨细胞则以相同密度接种于膜下层6孔培养板内，两种细胞比例为1:1。A组：BMP-14转染ADSCs后与软骨细胞共培养（1:1）B组：未转染的ADSCs与软骨细胞共培养（1:1）C组：单独BMP-14转染的ADSCsD组：单纯软骨细胞E组：单纯ADSCs5、阿利新蓝法检测葡萄糖氨基聚糖（GAG）含量，Western blot检测BMP-14和II型胶原蛋白表达，RT-PCR检测Sox-9和聚集蛋白聚糖（Agreecan）基因表达。通过以上检测指标比较各组间成软骨效应。结果1、通过对诱导后细胞的鉴定，证实所分离、培养细胞确为ADSCs。2、通过倒置荧光显微镜观察到腺病毒真核表达载体Ad-CMV-BMP-14-IRES-hrGFP-1转染ADSCs的最佳MOI值为150。3、阿利新蓝、Western blot、RT-PCR检测结果均显示有：A、C组明显高于其他三组，其中A组高于C组，差异均有统计学意义（P＜0.05），其余三组间，B、D组明显高于E组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。B、D组间差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论1、BMP-14转染后的ADSCs及ADSCs与软骨细胞共培养后均能向软骨细胞方向分化。2、BMP-14与软骨细胞共培养在ADSCs向软骨细胞分化过程中具有协同作