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背景 卵巢上皮性癌由于其起病隐匿，无典型症状，缺乏敏感而特异的早期诊断方法，五年生存率一直徘徊在30％，致死率居女性恶性生殖系统肿瘤首位。卵巢癌以广泛的腹腔内播散和大量的腹水形成为其生物学特征，即使已经是晚期，肿瘤仍主要局限于腹腔。肿瘤免疫微环境(tumor immunological microenvironment)是近年来深入研究肿瘤局部免疫细胞与肿瘤细胞的相互作用而提出的新概念，研究发现在肿瘤的早期，机体的全身免疫功能并未出现明显的改变，但是肿瘤局部即已存在免疫抑制。 在控制具有免疫原性的肿瘤细胞生长中，T细胞介导的免疫应答反应起最为重要的作用，抗原致敏的T细胞能特异性杀伤、溶解带有相应抗原的肿瘤细胞，并受MHC限制。若要诱导、激活T细胞介导的抗肿瘤免疫反应，肿瘤抗原需在细胞内加工成肿瘤抗原多肽，然后与MHC Ⅰ类分子结合共表达于肿瘤细胞表面，而被CD8 CTL识别，或者先从肿瘤细胞上脱落，然后由抗原递呈细胞(Antigen presenting cells，APC)摄取，加工成多肽，再由细胞表面的MHC Ⅱ类分子呈递给CD4~+ Th细胞。关于恶性肿瘤外周血T淋巴细胞亚群变化，一些研究发现，随着肿瘤的进展，其CD4~+／CD8比值下降或倒置，但对于许多恶性肿瘤尤其是早期病例在局部出现免疫抑制的状态下而全身免疫并无缺陷，因此通过检测患者外周血的免疫细胞分布来判断宿主的免疫反应并不完全。在局部抗肿瘤免疫中肿瘤浸润T淋巴细胞(Tumor-infiltrating lymphocyte，TIL)起着重要的作用。在患者体内它处于机体免疫系统与肿瘤相互作用的最前沿，其组成和功能等特征在一定程度上反映了机体抗肿瘤反应的性质、强度和总体水平。因此通过检测肿瘤局部免疫微环境中TIL对探索抗肿瘤免疫具有重浙江大学2004届硕士学位论文要意义。树突状细胞(Dendritic cell，DC)是一种重要的抗原专职递呈细胞，肿瘤微环境中的IL一2、GM一CSF等细胞因子能诱导DC浸润肿瘤组织，分布于肿瘤部位、捕获和加工抗原，然后迁移到区域淋巴结，在迁移过程中表型和功能发生改变，即上调DC表面的MHC一n类分子、CDSO、CD86、CD40等共刺激分子和勃附分子，成为成熟DC，在局部激活免疫反应。现有数种DC特异性的表面标记物，临床组织切片常以S一100蛋白作为确认DC的特异性标记.但是否所有的DC均表达S一100蛋白和S一100是否是成熟、激活DC的标记迄今尚未清楚。CD83是成熟DC的特异性标志，体内存在的静息DC不表达CD83，而只有体内激活的DC才表达DC83，且CD83‘的DC细胞同时表达参与T细胞激活的许多配体如CD86、CDSO和CD4O等，具有强大的激发同种混合淋巴细胞反应的能力。因此CD83被认为是DC充分成熟的标记。 近年来TIL在肿瘤组织中的分布已经引起关注，有研究发现在前列腺癌组织中大多数的cDS干细胞位于癌巢周围及其纤维组织，而癌巢内阳性细胞较少。也有作者发现结肠癌组织中的TIL在癌巢内、癌巢周围及其纤维组织分布和成熟DC分布相关。在卵巢上皮性癌组织中，发现癌巢内T淋巴细胞数量和患者无瘤生存时间和总生存时间存在明显的正相关性，但未见卵巢肿瘤组织中TIL的分布和患者的临床病理特征关系研究的报道，也未见TIL的分布和数量与DC关系的研究报道。 本实验通过免疫组化法，检测卵巢上皮性癌肿瘤组织和正常卵巢组织中的TIL的数量、分布及DC的密度和表型特征，以揭示卵巢上皮性癌组织中TIL、DC在卵巢癌局部免疫的作用，以及两者之间的关系，为卵巢上皮性癌的过继性免疫治疗提供理论依据。 材料和方法选择1999年1月至2000年12月间在浙江大学医学院附属妇产科医院接受初次手术治疗，并经组织病理学确诊的卵巢上皮性癌患者55例作为研究对象，选择2001年1月一4月间在浙江大学医学院附属妇产科医院接受手术治疗，并经组织病理学确定良性卵巢上皮性肿瘤32例作为良性对照组，选取因良性妇科疾病 非卵巢肿瘤而行妇科手术，且组织病理学证实为正常卵巢组织16例作为正常对照组， 以SP染色法检测组织中的CD4、CDS、S一100、CD83标志的表达。在光学显微镜下观察免疫组化染色切片，明确各标志的组织细胞定位和分布特征，将卵巢上皮性癌组 织分成二个区域:癌巢和间质，选择染色最满意之处，任选3个理想的高倍视野(400 2浙江大学2004届硕士学位论文x)下分别计数癌巢和间质内的CD4、CDS、CD83和S一100阳性细胞总数。所有的数据用SPss一0.0 ror windows软件包处理。采用非参数检验和Spearan相关分析法进行统计分析，显著性水准a=0 .05。 结果 1、卵巢上皮性癌组织中的CDS+、CD4+细胞数与良性和正常组相比差异有显著性(p值分别为0.000，0.000)。卵巢上皮性癌组织中癌巢内cD4+、cDS+细胞显著少于间质内(尸值分别为0.000，。.001)，癌巢内CD4+/CDS+值也显著低于间质内 (乃0.004)。间质内CD4+细胞数在晚期(nI一W期)患者显著高于早期(I一U期)患者，血CA.，