肾上腺髓质增生发病机制的初步研究

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目的:肾上腺髓质增生(Adrenal Medulla Hyperplasia,AMH)是近30年来逐渐被人们认识的一种少见疾病,临床表现为以高血压为主的综合症。其病因及发病机制尚不清楚。有研究表明,酪氨酸羟化酶(TH)在肾上腺髓质增生发病机制中起重要作用。通过对肾上腺髓质增生大鼠模型肾上腺组织酩氨酸羟化酶基因表达水平的研究探讨酪氨酸羟化酶蛋白在肾上腺髓质增生大鼠肾上腺组织中的表达与肾上腺髓质增生的关系及肾上腺髓质增生发生的分子机理。 方法:Wistar大鼠随机分为2组:正常对照组(NC组)和肾上腺髓质增生组(AMH组)。正常对照组,每只大鼠皮下注射0.9%的生理盐水1ml·kg-1·d-1,共6周。AMH组为肾上腺髓质增生组,按王卫星介绍的方法复制肾上腺髓质增生大鼠动物模型:每只大鼠皮下注射0.1%的利血平1ml·kg-1·d-1,共6周。从第6周开始隔日收集大鼠24h尿液。6周后下腔静脉穿刺采血,3000r/min离心制备血清。氯胺酮50mg·kg-1腹腔注射麻醉,取出肾上腺组织10%中性甲醛固定,石蜡包埋。免疫组化S-P法测定酪氨酸羟化酶蛋白在正常对照组和肾上腺髓质增生组大鼠肾上腺组织中的表达。合成酪氨酸羟化酶探针,用原位杂交法检测肾上腺组织酪氨酸羟化酶基因mRNA的表达,应用高清晰彩色病理图象测量系统(HPIAS-1000)进行免疫组织化学图象分析测定酪氨酸羟化酶免疫组织化学染色阳性反应物和原位杂交信号的平均积分光密度值(IDP)。用高效液相色谱分析仪检测大鼠24h尿液3—甲氧4—羟基苦杏仁酸(VMA)含量和血清中NE、E的含量。 结果:肾上腺髓质增生大鼠模型肾上腺组织酪氨酸羟化酶蛋白质及mRNA表达均明显增强,血清中的NE、E和24小时尿3—甲氧4—羟基苦杏仁酸(VMA)的含量明显升高。并且TH蛋白的表达与血清中的NE、E和24小时尿VMA的含量呈正相关(r=0.895,0.646,0.667,P<0.01)。 结论:肾上腺髓质增生大鼠模型肾上腺组织酪氨酸羟化酶基因表达增强,且酪氨酸羟化酶的mRNA水平亦明显增高,血清NE、E的含量和24h尿VMA含量较正常对照组明显升高,TH蛋白的表达与24h尿VMA含量、血清NE、E含量呈正相关。酪氨酸羟化酶基因的过度表达可能是肾上腺髓质增生发生的分子机理之一。
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