槲皮素对HO所致内皮细胞损伤的保护

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目的:研究槲皮素对H2O2所致人脐静脉内皮细胞株ECV304氧化性损伤的保护作用及其作用机制。
   方法:采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304,用MTT法筛选H2O2致细胞损伤的最佳浓度,在模型的基础上,流式细胞仪测定内皮细胞坏死率和平均荧光强度的变化;ELISA法检测内皮细胞培养液TM含量;荧光分光光度法测定内皮细胞培养液中LDH的含量;RT-PCR技术测定PAI-1 mRNA的相对表达;Western Blot法测定内皮细胞caspase-3的活性;共聚焦激光扫描显微镜测定细胞内游离钙离子浓度的变化。
   结果:
   1.槲皮素可以使培养液中TM和LDH的含量减少,降低内皮细胞坏死率和平均荧光强度。
   2.槲皮素可以并能下调PAI-lmRNA的表达。
   3.槲皮素可以降低caspase-3活性,减少细胞内游离钙离子浓度的增加幅度。
   结论:
   1.槲皮素能减少H2O2损伤后内皮细胞培养液中LDH和TM的含量并可降低PI染色阳性率,减少细胞死亡率,可知槲皮素具有明显的内皮细胞保护作用,其保护作用可能与清除氧自由基,抗脂质过氧化,修复和保护细胞膜的完整性有关。
   2.槲皮素能下调H2O2处理的内皮细胞PAI-lmRNA的表达,可能通过抗凝纤溶功能发挥抗血栓作用。
   3.槲皮素对H2O2诱导的内皮细胞损伤的保护作用与其抑制细胞内钙离子浓度的升高和降低caspase-3的活性有关。
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