本文以水产品中常见的致病菌一副溶血性弧菌为研究对象,通过超高压处理筛选获得副溶血性弧菌耐高压菌株,探究微生物耐超高压胁迫的机制。首先筛选分离耐超高压胁迫的副溶血弧菌菌株,研究细菌细胞膜组成成分及细胞中成分在高压胁迫下的应激机制,从而为微生物耐高压胁迫机理的研究提供基础数据。具体结论如下：研究了副溶血性弧菌对超高压处理的耐受能力,发现经250MPa及以上的压力处理,副溶血性弧菌的致死率可达100%。利用80-250MPa超高压反复处理后分离得到的耐压菌株经250MPa压力胁迫处理,存活量较原始菌株提高了3个数量级。筛选分离获得了耐超高压胁迫的副溶血弧菌,并对耐压菌株和原始菌株细胞膜通透性、细胞膜可溶性蛋白、Na+K+ATP酶活性、细胞无机盐离子含量的差异进行测定。耐压菌株细胞膜通透性与原始菌株无显著差异,细胞膜可溶性蛋白在分子量为36KDa附近浓度明显增大。耐压菌株Na+K+ATP酶活性大大提高。耐压菌株细胞钾、钠、钙、镁离子的含量均比原始菌株的低,但锌离子含量比原始菌株高。经过相同的压力处理,耐压菌株胞内抗氧化相关酶的相对酶活降低幅度较小,而原始菌株降低幅度较大。通过GC-MS方法分析耐压菌株与原始菌株细胞膜脂肪酸的组成,结果显示耐压菌株不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸的比例(USFA/SFA)增大,不饱和脂肪酸的流动性强,利于细胞处于高压环境中细胞的形变,维持细胞的结构完整。通过实时荧光定量PCR研究基因表达的差异,揭示耐压菌株耐超高压胁迫的内在机制,qRT-PCR结果显示耐压菌株△9脂肪酸脱饱和酶表达量上调,这与GC-MS脂肪酸分析结果一致。研究表明细菌细胞膜上组成成分的变化特别是脂肪酸组成的变化、可溶性膜蛋白变化、胞内抗氧化相关酶酶活的耐压性变化以及Na+K+ATP酶活性变化是耐压菌耐受高压的重要原因。