【摘 要】
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目的:本实验将骨髓间充质干细胞的移植治疗引入大鼠皮肤损伤的治疗中。观察并研究大鼠骨髓间充质干细胞注射治疗皮肤损伤的有效性和安全性。方法:(1)大鼠的分组及皮肤损伤的模
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目的:本实验将骨髓间充质干细胞的移植治疗引入大鼠皮肤损伤的治疗中。观察并研究大鼠骨髓间充质干细胞注射治疗皮肤损伤的有效性和安全性。方法:(1)大鼠的分组及皮肤损伤的模型建立;(2)大鼠骨髓间充质干细胞的体外分离、培养、纯化、扩增和传代;(3)流式细胞仪鉴定大鼠骨髓间充质干细胞的免疫表型;(4)大鼠骨髓间充质干细胞的BrdU染色标记;(5)骨髓间充质干细胞局部注射;(6)设计组及对照组两组创面愈合率差异的统计学分析;(7) Western blot检测大鼠创面角质化细胞生长因子蛋白(keratinocyte growth factor,KGF)的表达;(8)建模后连续创面组织病理学观察结果:(1)成功完成了大鼠骨髓间充质干细胞的体外分离、培养、纯化、扩增和传代,流式细胞仪检测大鼠骨髓间充质干细胞CD29、CD105、CD44阳性细胞平均表达分别为99.99%、99.22%、100%;阴性表达为CD45为0.50%。表明获得的细胞是一组纯化的大鼠骨髓间充质干细胞,并且纯度符合实验要求。(2)实验组及对照组大鼠未愈合创面外观比较,显示实验组创面外观愈合情况明显优于对照组;两组创面愈合率也存在明显的的统计学差异,提示实验组创面愈合率优于对照组;(3)根据HE染色后的皮肤组织切片的愈合评分标准,实验组总分5分,对照组总分3分,可明显发现建模后14天实验组小鼠创面愈合情况优于对照组;(4)建模后14天,实验组与对照组KGF蛋白的Western Blot条带显示结果显示实验组创面组织中的KGF蛋白表达较高。结论:将骨髓间充质干细胞的移植治疗引入大鼠皮肤损伤的治疗,可以促进大鼠皮肤损伤的愈合。
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