论文部分内容阅读
目的：研究补阳还五汤对缺氧损伤神经干细胞分化及Wnt1、Wnt3a的影响,探讨补阳还五汤对缺氧损伤神经干细胞的分化作用及可能机制。方法：1.体外培养野生(C57BL/6)小鼠胎鼠神经干细胞体系,进行神经干细胞鉴定获取实验用细胞2.将实验细胞分为缺氧+含药血清组(A组),缺氧+空白血清组(B组),正常+含药血清组(C组),正常+空白血清组(D组)。3.采用免疫荧光化学法检测A组、B组、C组、D组细胞NF200和GFAP的表达情况,检测补阳还五汤对缺氧损伤神经干细胞的影响。4.采用qRT-PCR相对定量检测A组、B组、C组、D组细胞NF200、GFAP、Wnt1、Wnt3a的表达,进一步研究探讨补阳还五汤对缺氧损伤神经干细胞分化的影响,及其可能机制。结果：1.免疫荧光化学法检测不同干预条件下各组神经干细胞中NF200与GFAP均有一定表达,各组间有一定差异。2.qRT-PCR法相对定量检测不同干预条件下NF200与GFAP的表达：与B组比较A组神经干细胞中NF200的表达明显增加,有明显统计学意义(p<0.01)；与D组比较C组神经干细胞中NF200的表达增加,有统计学意义(p<0.05)；与B组比较A组神经干细胞中GFAP的表达增加,有统计学意义(p<0.05)；与D组比较C组神经干细胞中GFAP达增加,有统计学意义(p<0.01)；与A组相比,其余3组NF200与GFAP mRNA相对量的比值均具有统计学意义(P<0.05)；与C组比,D组,NF200与GFAP mRNA相对量的比值无明显统计学意义(P〉0.05)。3. qRT-PCR法相对定量检测不同干预条件下各组神经干细胞中Wntl与Wnt3a的表达：与B组比较A组神经干细胞中Wnt1、Wnt3a的表达增加,有统计学意义(p<0.05)；与D组比较C组神经干细胞中Wnt1、Wnt3a的表达增加,有统计学意义(p<0.05)；与D组比较B组神经干细胞中Wnt1、Wnt3a的表达增加,有统计学意义(p<0.05)。结论：1.补阳还五汤具有促神经干细胞和缺氧损伤神经干细胞分化的作用。2.补阳还五汤促缺氧损伤神经干细胞分化过程中更趋向于向神经元的分化3.Wnt1和Wnt3a可能参与了补阳还五汤促缺氧损伤神经干细胞分化的过程。