南方红豆杉优树选择及子代测定研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:zi198
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南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairer)又名美丽红豆杉,是红豆杉科红豆杉属红豆杉(T.chinensis)的一个变种,也是红豆杉属植物在中国分布最广泛的一种,为国家一级珍贵保护植物,它集用材、药用和观赏于一体,其体内提取的紫杉醇(Paclitaxel,商品名Taxol)是目前世界上公认的广谱、强活性的抗癌药物,现已被多个国家批准应用于临床治疗卵巢癌和乳腺癌等。但因红豆杉分布零散,极少成林,且生长缓慢,且紫杉醇目前仍依赖于从野生分布的红豆杉属植物体中提取,使其供求矛盾异常突出。亟待解决的紫杉醇资源问题就成了世界各国研究的热点,也是该药能否扩大应用的关键因素。为缓解这一矛盾,本项目旨在福建省内选出紫杉醇及其生物合成前提物含量高的优树,并进行壮苗培育技术研究,本文是该项目的阶段性试验结果。 1.通过正交试验设计,样品重是提取测定的关键因素,同时,浸泡时间还是紫杉醇、10—去乙酰巴卡亭—Ⅲ、巴卡亭—Ⅲ提取测定的第二个关键因素。紫杉醇提取测定的最简便方法为:称取样品3g,放入20ml甲醇与二氯甲烷的比例为9∶1的混合液中,在35℃下浸泡36h;10—去乙酰巴卡亭Ⅲ提取测定的最简便方法为:称取样品2g,放入20ml甲醇与二氯甲烷的比例为7∶1的混合液中,在40℃下浸泡12h;巴卡亭—Ⅲ提取测定的最简便方法为:称取样品3g,放入20ml甲醇与二氯甲烷的比例为9∶1的混合液中,在35℃下浸泡36h;三尖杉宁碱提取测定的最简便方法为:称取样品4g,放入10ml甲醇与二氯甲烷的比例为7∶1的混合液中,在35℃下浸泡36h。 2.通过对南方红豆杉的皮、根皮、根、种子、叶、小枝、干中Paclitaxel、10-DBA Ⅲ、Baccatin Ⅲ、Celphalimannine含量分析,结果表明Paclitaxel和Celphalimannine含量在树体中的高低分布均为:皮>根皮>根>种子>叶>小枝>干;10-DBA Ⅲ在树体中的高低分布为,叶>皮>根皮>小枝>种子>根>干;Baccatin Ⅲ含量在树体中的高低分布为,叶>小枝>种子>皮>根皮>根>干。 3.通过聚类分析,将福建省南方红豆杉依紫杉醇及其同系物含量可分为三类。第Ⅰ类包括武夷山、浦城、永春和漳平这4个,为高含量地区,第Ⅱ类包括松溪、南平、三明、沙县、明溪、龙岩、上杭、仙游、大田、德化、福清、闽侯、罗源、闽清、福鼎、古田、屏南、柘荣这18个地区,为中等含量种源;第Ⅲ类种源是永安,为低含量。根据综合性状评分法复选,把78株初选优树得分值分为4类,分别为“极高”、“高”、“中”、“低”4个等级,其中前两类共15株,为药用型南方红豆杉优树,入选率为19.23%。 4.基因库共保存15个优良药用家系,59个无性系,目前生长良好。项目开展三年以来,在福州扦插59个家系,共计保存插条苗木431株,在三明明溪扦插51家系,共计保存插条苗木1187株。 5.通过苗期区域子代测定结果表明,15个家系在两试验点中均与对照均成正向极显著差异,都是值得注意的优良药用家系。其中21、34、56、77这4个家系在S1和S2中的平均遗传增益都是最高,最值得关注。经两试验点联合方差分析,家系主效应、地点主效应和家系×地点互作效应均达极显著。这表明试验中含有增、减产极显著家系,而增、减产程度又与试验地点的不同而不同,参试地点间存在使所有家系都显著增产或减产的效应。对各家系紫杉醇平均含量、参试地点和各地点家系紫杉醇平均含量作多重比较,结果表明,15个家系均与对照有极显著的正向差异,其中21、34、
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