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前言 人类生殖能力在不断下降,大量的异常生殖结局是父源性的。动物实验研究已证实了众多环境和职业性健康危害因素的生殖毒性,其中农药杀虫剂对人类生殖功能的危害已受到广泛的重视。 拟除虫菊酯是根据天然除虫菊素的结构人工合成的农药,近几十年来以其广谱、高效、低残留和选择性毒性的显著特点在世界范围内得到了迅猛发展和广泛应用,是目前我国常用农药之一。国内外学者对其神经毒性和免疫毒性做了大量的工作,随着使用范围的不断扩大和使用量的增加,长期低浓度接触该类农药对人类生殖功能的影响日益受到人们的关注。 高效氯氰菊酯,又名乙体氯氰菊酯(β-cypermethrin,β-CP)是目前应用较为广泛的拟除虫菊酯类农药,是从普通氯氰菊酯(cypermethrin,CP)经差向异构得到的2对活性较高的对映体,活性比CP高1倍。是一种更为高效、广谱、速效的杀虫剂,并具有较长的持效性。国内β-CP的生产规模较大,广泛应用于农业害虫、卫生害虫、牲畜害虫、贮粮害虫等的防治。有报道表明CP和溴氰菊酯对雄性大鼠具有生殖毒性,但有关β-CP的生殖毒性研究尚未见报道。 睾丸是雄性动物的主要生殖器官,化学物质除了可以对睾丸产生直接毒作用外,还可通过影响下丘脑-垂体轴性激素分泌水平,对睾丸产生间接毒性作用。本研究通过对β-CP染毒雄性大鼠进行精子分析、血清中性激素水平测定以及睾丸组织病理学检查,探讨β-CP对雄性大鼠生殖功能的影响,为保护接触者的生殖健康提供依据。 材料与方法 1.动物分组及染毒 成年Wistar雄性大鼠按体重随机分成4组,每组10只,分别用 0、20、40、80mg/kg.bw剂量的 p-CP连续染毒 SW,每天 1次经口灌胃,食用色拉油稀释受试物质,对照组给予色拉油。 2.观察指标及检测方法 2.二 动物体重及睾丸、附睾系数:直接称量并计算。 2.2 精子检查:按常规方法对精子数、精子活动度及精子畸形进行检测。 2.3 血清性激素水平的测定:按照试剂盒说明书应用放射免疫技术对血清睾酮(testosterone,T)、卵泡刺激素(follicle stimula-ting hormone,FSH)和黄体生成素(lutenizing hormone,LH)水平进行测定。 2.4 睾丸组织病理学检查:一侧睾丸经10%福尔马林固定,常规制片kE染色,光镜下观察;另一侧睾丸经 2.5%戊二醛固定,树脂包埋,超薄切片,醋酸铀及柠檬酸铅染色,透射电镜下观察超微结构的改变。 3.统计分析 用SPSS软件对实验数据进行方差分析、·q检验。 实验结果 1.动物体重及睾丸、附睾系数 各剂量组动物体重、睾丸重量及其系数、附章重量及其系数与对照组相比,均无显著性差异h>0.05人 2.精子检查 ·2· 各剂量组动物精子数及精子畸形检查结果与对照组相比,未见显著性差异帅>0.05人高剂量组动物活精率N0.50%)及精子活动度门6.55%)明显低于对照组(分别为 78.75%和72.20%入呈显著性差异h<0.05人 中、低剂量组与对照组相二,未见显著性差异(p>0.05 :)。 3.血清性激素水平测定 随着剂量的增加,血清T、yH水平呈升高趋势,血清LH水平呈下降趋势,其中高剂量组动物血清 T门.56ng/ml )\ FSH (.56mIU/ml厂LH(6.98InIU/Inl)Z平与对照组(分别为2.20ng/rnl。2.89mIU/ml和 8.46mlU/Inl)相比,差异显著(p< 0.05)。中、低剂量组与对照组相比,未见显著性差异h>0.05人 4.睾丸组织病理学检查 4.1 光镜检查结果:高剂量组大鼠睾丸曲细精管管腔变大,生精上皮细胞排列疏松并有大量生精细胞脱落,镶嵌在支持细胞内的精子明显少于对照组。低、中剂量组大鼠睾丸光镜检查结果未见异常。 4.2 电镜检查结果:高剂量组大鼠事丸间质细胞未见异常;支持细胞轮廓不清,核膜破损,胞质内线粒体呈空泡样改变,部分胞质溶解;各级生精细胞内均可见到呈空泡样改变的线粒体,核内染色质多凝集成块,核内基质变空,胞质内容物排列紊乱;曲细精管管腔内可见成熟精子位于多个空泡变性的精子细胞间。 工 论 拟除虫菊酯是继有机磷、有机氯等农药之后的一种新型杀虫剂。目前对该类农药的生殖毒性方面报道较少,且说法不一。本实验对应用比较广泛的p-*P进行了雄性大鼠生殖毒性的研究。 精子是在睾丸的曲细精管内产生,随着睾丸的发育成熟,曲细 ·3·精管内的精原细胞不断分裂增殖,逐步形成初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞,精子细胞经过变态成为精子。在大鼠,从一个精原细胞分化成为成熟的精子,约需48天,人类需要64天。Abd-el-aziz等人报道连续 65 d染毒汉氰菊酯的雄性大鼠附寒精子数、活精率和精子活动度降低,死精子和畸形精子增多。ElbetiehaA等人研究发现,连续12W染毒CP的SD?