小白菊内酯对肾小管间质损伤的影响及作用机制的研究

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目的探索天然化合物小白菊内酯(parthenolide,PTL)对肾小管间质损伤及纤维化的影响及其作用机制。方法将30只成年雄性标准体重大鼠,体重200-220mg,完全随机分为3组:A假手术组,B模型组,C PTL组,每组10只大鼠。全部大鼠适应性喂养1周后,B组和C组采用手术结扎左侧输尿管构建肾小管间质损伤纤维化模型,A组仅游离左侧输尿管,不予以结扎,其余麻醉及手术步骤一致。C组于手术后当天予以小白菊内酯10mg/kg/d(溶于5ml 0.05%DMSO溶液)腹腔注射,A组、B组予以等量溶媒0.05%DMSO溶液5ml腹腔注射。3组治疗疗程均为14天。14天后三组大鼠心脏采血测量尿素氮(blood urea nitroge,BUN)、肌酐(serum creatinine,Scr),病变肾脏行HE染色评价肾小管间质损伤指数,Masson染色评价肾小管间质纤维化指数,免疫组织化学染色测定梗阻侧肾脏核转录因子NF-κB/P65(nuclear factor-kappa B/P65,NF-κB/P65)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、单核细胞趋化分子1(monocyte chemoattractant 1,MCP1)的表达。结果1、模型组的血Scr和BUN明显高于假手术组和PTL组(P<0.01),经PTL干预14天后,BUN、Scr较模型组明显降低,但仍高于假手术组(P<0.01)。2、H.E染色示:假手术组肾脏形态结构正常,肾小管背靠背的紧密的排列在一起,基底膜完整,无炎症细胞浸润,模型组肾小球病变轻微,以肾小管-间质部改变最为显著,表现为肾小管重度扩张、萎缩、管型形成、间质水肿增宽、炎症细胞弥漫性浸润,PTL组肾小球形态大致正常,小管间质部有轻度改变但较模型组显著减轻。标本经H.E染色后进行肾小管间质损伤指数评价,模型组肾小管间质损伤指数较假手术组和PTL组明显升高(P<0.01),PTL组肾小管间质损伤指数较假手术组升高,但较模型组下降明显(P<0.01)。3、Masson染色示:模型组有大量蓝色胶原沉积,假手术组和PTL组仅发现微量或少量蓝色胶原沉积。标本经Masson染色后进行肾小管间质纤维化指数评价,模型组肾小管间质纤维化指数明显高于假手术组和小白菊内酯组(P<0.01),经小白菊内酯治疗后,PTL组肾小管间质纤维化指数明显低于模型组但仍高于假手术组(P<0.01)。4、模型组梗阻侧肾脏NF-κB/P65、TNF-α、MCP1的表达较假手术组和PTL组明显增多(P<0.01),PTL组的肾脏NF-κB/P65、TNF-α、MCP1的表达较假手术组轻度增加(P<0.01),但显著低于模型组(P<0.01)。5、NF-κB/P65、TNF-α、MCP1与肾小管间质纤维化指数有显著的正相关关系(P<0.0001),TNF-α、MCP1、NF-κB/P65两两间呈正相关的关系(P<0.0001)。结论1、小白菊内酯可以减轻UUO大鼠肾小管间质损伤及纤维化,具有肾脏保护作用。2、小白菊内酯减轻肾小管间质损伤及纤维化的作用机制可能因其能够下调NF-κB/P65、TNF-α、MCP1的表达有关。
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