橘小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)是一种世界性分布、具有重要经济意义的实蝇类害虫,食性杂,繁殖力强,每年给果蔬业造成重大经济损失。现阶段呈现发生范围广、危害加重、连年大发生的特点,原有的以化学防治为主的防控措施已不能控制橘小实蝇的扩散和危害,迫切需要建立新的防控策略。本文以精子调控为切入点,利用RNAi技术研究橘小实蝇雄虫精子发生相关基因的功能及对成虫生殖力的影响,将为探索新的防控措施提供新思路、新方法。本研究在获得的橘小实蝇转录组数据库基础上,选取了gld2、tim、rae1、gudu四个精子发生过程基因为靶标基因,分别用饲喂和显微注射ds RNA的方法将其分别沉默,研究gld2、tim、rae1、gudu基因对橘小实蝇生殖的影响,主要结果如下:1.成功克隆橘小实蝇gld2、tim、rae1、gudu基因片段,其c DNA序列分别为505bp、642bp、866bp、585bp。通过序列比对,gld2、tim、rae1、gudu均与瓜实蝇同源性最高,相似性分别达到91%、91%、91%、89%。2.饲喂处理使gld2、tim、rae1、gudu基因沉默后,各基因均能导致单雌产卵量降低。对照组为25.2粒,而处理组依此为11粒、17.9粒、11.4粒、12.3粒;也均能导致卵的孵化率显著降低。对照组孵化率为83.3%,而处理组孵化率降至70.6%、70.7%、67.3%、69.9%;gld2、tim、rae1饲喂处理后基因相对表达量显著下调,分别下调至55%、39%、38%。而dsgudu处理导致基因表达量上调至430%。3.注射处理使gld2、tim、rae1、gudu基因沉默后,交配比率与对照组相比具显著降低;其中gld2、rae1、gudu三个基因沉默后能导致单雌产卵量显著降低。对照组孵化率为12.8粒,而处理组降至8.1粒、5.5粒、6.3粒。另外,这四个基因分别沉默后均能导致卵的孵化率显著降低。对照组孵化率为84.2%,而处理组孵化率降至58.5%、65.1%、52.9%、69.1%。在分子水平,dsgld2、dsrae1处理后,基因表达量出现显著下调,分别下调至57%和52%;dstim、dsgudu处理后表达量则明显上调,分别上调至890%和230%。