桑葛饮对糖尿病视网膜病变的作用及机制研究

来源 :山东中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:A511429239
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第一部分滋阴清热法治疗糖尿病视网膜病变的Meta分析目的:运用Meta分析对应用滋阴清热法为主治疗糖尿病视网膜病变的临床疗效进行系统评价。方法:采用互联网检索Pub Med、Cochrane图书馆、Embase数据库、CBM数据库、中国知网(CNKI)、维普和万方医学数据库等自2012年2月1日至2022年2月1日近10年的所有的以滋阴清热法为主治疗糖尿病视网膜病变的随机对照临床试验文献。依照标准由两名评论员独立分析纳入文章,运用Revman5.4软件进行系统评价。结果:纳入研究28项,共有患者2442例。将使用西医对照治疗的对照组和联合滋阴清热法治疗的实验组的总有效率、视力水平、中医证候积分、血液流变性、血流动力学、黄斑厚度值、不良反应均分别纳入Meta分析,探讨滋阴清热法治疗糖尿病视网膜病变的临床疗效。1实验组较对照组临床疗效明显提高:OR=3.34,95%CI(2.68,4.16),Z=10.76,P<0.00001。2实验组较对照组改善视力疗效更明显:MD=1.31,95%CI(0.62,2.00),P<0.00001。3实验组较对照组能有效降低中医症候积分:MD=-5.01,95%CI(-7.36,-2.66),P<0.00001。4实验组较对照组能有效改善血液流变性:全血高切黏度MD=-1.04,95%CI(-1.18,-0.91),P<0.00001;全血低切黏度MD=-0.71,95%CI(-1.39,-0.04),P<0.00001;血浆黏度MD=-0.34,95%CI(-0.56,-0.12),P<0.00001;红细胞压积MD=-3.85,95%CI(-8.17,-0.47),P<0.00001。5实验组较对照组能有效改善血液动力学:PI MD=-0.37,95%CI(-0.48,-0.25),P<0.00001;RI MD=-0.20,95%CI(-0.31,-0.10),P<0.00001;PSV MD=2.46,95%CI(2.16,2.76),P<0.00001;EDV MD=0.58,95%CI(0.47,0.69),P<0.00001;CRV MD=-1.45,95%CI(-1.76,-1.15),P<0.00001.6实验组较对照组能有效降低黄斑厚度:MD=-24.45,95%CI(-45.85,-3.04),P<0.00001。7实验组较对照组能有效改善眼底出血:MD=-0.87,95%CI(-1.50,-0.24),P<0.00001。8实验组和对照组不良反应出现率无统计学差异。结论:以滋阴清热法为主治疗糖尿病视网膜病变疗效显著,其临床疗效、视力水平、中医症候积分、血液流变学、血液动力学、黄斑厚度、出血灶面积均优于对照组,具有较高的临床价值。第二部分基于网络药理学探讨桑葛饮治疗糖尿病视网膜病变的分子机制目的:基于网络药理学预测桑葛饮治疗糖尿病视网膜病变的作用机制。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库筛选检索桑葛饮的主要成分,并通过TCMSP平台筛选潜在的成分靶点,结合TTD数据库、Drugbank数据库、Dis Ge NET数据库、OMIM数据库、CTD数据库、Gene Cards数据库检索相关疾病靶点,应用蛋白互作网络分析数据库(String)构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络模型,通过Metascape平台对核心靶点进行GO和KEGG通路分析。结果:从桑葛饮中共筛选得到43个活性成分,250个靶点,治疗DR靶点90个。通过富集分析可知桑葛饮可能作用的靶点有AKT1、TNF、ALB、TP53、CASP3、IL6、IL1B、HIF1A、JUN、PPARG等,可能作用的通路有癌症通路、TNF信号通路、NF-κB信号通路等。结论:桑葛饮治疗糖尿病视网膜病变的炎症反应等环节中发挥显著作用,为今后实验研究提供理论依据。第三部分基于TNF-α/NF-κB通路探讨桑葛饮对糖尿病视网膜病变的防治作用及机制研究目的:通过动物实验,研究桑葛饮对糖尿病大鼠视网膜病变的作用,并初步探究其可能的机制。方法:选取60只雄性Sprague Dawley(SD)大鼠,随机分为正常、模型组、桑葛高剂量组、桑葛低剂量组,每组15只。适应性喂养1周后一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)55mg/kg诱导糖尿病模型。桑葛低剂量组、桑葛高剂量组分别灌胃不同浓度的桑葛饮水煎液,正常组与模型组给予等量无菌水灌胃。灌胃时长为12周,期间每周记录大鼠一般状态、体重、血糖,实验结束后取眼球、视网膜组织。视网膜病理切片观察视网膜病理组织变化;q RT-PCR法检测视网膜组织TNF-α、IKKβ、VEGF、IL1β的m RNA表达;Western Blot法检测视网膜组织TNF-α、IKKβ、p-NFκB p65、VEGF、IL1β蛋白的表达。结果:1一般状态:正常组大鼠实验期间一般状态良好,血糖平稳,体重随周龄稳步增长,晶体透明;模型组大鼠血糖处于高水平,消瘦,晶体混浊;与模型组相比,桑葛饮低、高剂量组大鼠的一般状态有一定程度改善,血糖值、体重与模型组相比无统计学意义。2视网膜组织染色:对比可见正常大鼠视网膜结构与人类视网膜结构相似,分层清楚,排列整齐。模型组大鼠视网膜部分细胞呈空泡样变性,排列紊乱。中药高剂量、桑葛低剂量组细胞排列较整齐,少见细胞水肿。3桑葛饮对视网膜TNF-α、IKKβ、VEGF、IL1βm RNA表达的影响:模型组大鼠视网膜组织中的TNF-α、IKKβ、VEGF、IL1β含量明显高于正常组大鼠(P<0.05);桑葛高剂量组和桑葛低剂量组大鼠视网膜组织中的TNF-α、IKKβ、IL1β含量明显低于模型组大鼠(P<0.05);桑葛高剂量组大鼠视网膜组织VEGF明显低于模型组大鼠(P<0.05)。4桑葛饮对视网膜TNF-α、IKKβ、p-NFκB p65、VEGF蛋白的表达的影响:与正常组相比,模型组大鼠视网膜组织中TNF-α、IKKβ、p-NFκB p65、VEGF、IL1β蛋白含量上升(P<0.01);与模型组相比,桑葛高剂量组和桑葛低剂量组TNF-α、IKKβ、p-NFκB p65、VEGF、IL1β蛋白含量下降(P<0.01)。结论:1一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)55mg/kg诱导糖尿病SD大鼠模型成模率高、死亡率低,可用作基础实验探究DR的发生发展与治疗。2桑葛饮可作用于TNF-α/NF-κB通路,降低IKKβ的m RNA和蛋白含量,抑制NF-κB核转移,下调VEGF、IL1β表达,减缓新生血管生成和慢性炎症。
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