目的:左心室病理性心肌肥厚是高血压最常见的并发症,它也是心血管疾病死亡率增加的独立危险因素之一。因此,当前治疗高血压病的重要目标之一是逆转心肌肥厚。据报道,唾液酸化在心肌肥大的发生过程中明显增强。本研究所关注的是唾液酸转移酶7A(Siat7A)。有研究表明,高血压大鼠(不同基因背景)的肥厚心肌组织中,在检测的约两万基因中,Siat7A是唯一呈持续性升高的基因,并且与遗传背景无关。低氧诱导因子-1(Hif-1)是由Hif-1α和Hif-1β组成的异源二聚体转录因子。其中Hif-1α在病理性心室肥厚早期表达增加。尽管Hif-1a对压力超负荷或急性缺血显示短期的有益作用,但持续时间较短。Hif-1α长期慢性增加对心脏起恶化作用。由此,本研究的目的是:1.检测Siat7A、Hif-1α蛋白表达水平在病理性心肌细胞肥大中的作用。2.检测在心肌细胞肥大时Hif-1α表达激活是否受Siat7A的调节。3.检测Hif-1β在病理性心肌肥厚中是否发挥作用。材料方法:临床患者心脏组织病理切片;细胞AC16;四种慢病毒感染AC16细胞,从中筛选出稳定表达的sh Siat7A、sh Hif-1α、over Siat7A的细胞株;Wistar大鼠;HE染色评估心肌肥厚;免疫组织化学染色检测Siat7A、Hif-1α的定位表达;q-PCR技术检测Siat7A、Hif-1α、钠尿肽(ANP)、Hif-1β的基因表达水平。Western Blotting方法检测Siat7A、Hif-1α、ANP蛋白表达水平。结果:Siat7A与Hif-1α在高血压心肌肥厚患者的心脏组织中表达增加;体外分别用0μM、1μM的AngⅡ作用于AC16细胞、携带空质粒或sh Siat7A序列质粒的慢病毒感染的细胞、携带空质粒或过表达Siat7A序列质粒的慢病毒感染的细胞、携带空质粒或sh Hif-1α序列质粒的慢病毒感染的细胞。结果可得:用AngⅡ(0μM、1μM)作用于AC16细胞24h,Siat7A、Hif-1α、ANP蛋白表达增加;敲低Siat7A表达后,Siat7A蛋白表达受抑制,ANP蛋白表达减少;同时Hif-1α蛋白表达也减少。过表达Siat7A后,Siat7A蛋白表达增加,ANP蛋白表达增加,同时Hif-1α蛋白表达也增加;敲低Hif-1α表达,ANP表达减少,但Siat7A蛋白表达不减少;在AC16细胞中,AngⅡ(24h,1μM)作用后Hif-1βm RNA表达水平不变;敲低Siat7A表达后,Hif-1βm RNA表达水平也不变。体内实验中,为制备敲低心肌组织的Siat7A基因,将携带干扰Siat7A基因的腺相关病毒(AAV9)局部注射进入大鼠心脏左室壁,同时皮下埋泵持续输注血管紧张素Ⅱ诱导大鼠心肌肥厚。为制备心肌组织特异性高表达Siat7A基因,在心肌肌钙蛋白T(c TNT)启动子下通过静脉注射编码Siat7A的AAV9载体,输注血管紧张素Ⅱ诱导大鼠心肌肥厚。结果显示:敲除Siat7A下调Hif-1α减轻了AngⅡ诱导大鼠的心肌肥厚。过表达Siat7A上调Hif-1α加剧了AngII诱导大鼠的心肌肥厚。结论:1.高血压心肌肥厚患者的心脏组织中Siat7A、Hif-1α表达增加。2.体内外实验显示,Siat7A介导Hif-1α促进心肌细胞肥大。3.AngⅡ诱导的心肌细胞发生肥大时Hif-1βm RNA表达不变。