原发性肝癌(以下简称肝癌)的发病率和死亡率分居我国癌症发病率和死亡的第4位和第2位,严重威胁我国人民的生命和健康。临床目前对肝癌的治疗方法包括肝切除术、肝移植术、放化疗法等,但治疗后复发率仍高达80%～90%,且患者生存质量并未得到有效改善。癌症的发生发展是一个多基因参与、多步骤、多阶段、体内外因素互相作用的复杂过程,以往的癌症疗法主要针对单一靶点,癌细胞易通过代偿途径产生抗性,导致治疗失败。多靶点疗法可同时作用于多个靶点,增强疗效,且不易使癌细胞产生抗药性。血管生成和细胞调亡对于癌症的发展非常关键。而斑马鱼具有饲养简单、成本较低、繁殖力强、胚胎透明、个体较小、遗传信息丰富、光学透明性特点,以及基于转基因品系斑马鱼建立的斑马鱼肿瘤移植模型,使我们能更直观的研究肿瘤细胞在斑马鱼体内的生长情况和肿瘤诱导的新生血管在体内的变化。由于中药具有多靶点作用机制,近年来,在肿瘤疾病防治中,中药在减轻化疗不良反应、提高患者生存质量和预防肿瘤细胞复发或转移等方面均取得不错的成绩。使其在肿瘤药物研发中表现出诱人的应用前景。肉桂,是我国传统的药食同源的植物,中医临床上常用于治疗多种疾病,现代药理研究表明,肉桂可以显著抑制宫颈癌、肺癌、胃腺癌、乳腺癌、肝癌等多种癌细胞的增殖。但目前关于肉桂对肝癌作用方面的研究较少。由于中医临床治疗肿瘤过程中,肉桂常采用水煎液形式入药,故本课题以肉桂水提物为研究对象,探究其抑制肝癌的功效和机制。实验室前期研究发现,肉桂水提物对斑马鱼幼鱼血管新生具有抑制作用,结合文献,我们推测肉桂可能通过促进细胞凋亡、抑制肿瘤新生血管的生成达到抑制肿瘤生长的作用。本论文将以人肝癌Be17402细胞和荷瘤斑马鱼模型为研究对象,通过测定细胞增值抑制率、观察细胞周期变化、测定细胞凋亡情况并计算凋亡率、观察体内肿瘤生长情况和观察肿瘤诱导新生血管生长情况,研究肉桂水提物对肝癌细胞生长的影响并探讨其作用机制。实验研究共分三章,简述如下:第一章:通过不同浓度肉桂水提物(50、100、200、400、800、1000μg/mL)体外作用肝癌Bel7402细胞不同时间(24h、48h、72h)后,利用MTT法检测细胞增殖的情况,发现随着药物浓度的增加,作用时间延长,肝癌Bel7402细胞增殖抑制率也依次明显上升(P<0.05)。基于MTT实验结果,选取肉桂水提物(200、400、800μg/mL)干预肝癌Bel7402细胞48h,作用完成后,收集处理后的细胞,通过PI染色--流式细胞仪检测细胞周期变化、Annexiv/PI双染法--流式细胞仪观察细胞凋亡并计算细胞凋亡率,实验结果显示,经肉桂水提物干预48 h后,人肝癌Bel7402细胞处于G1期的比例显著提高而处于S期的比例显著降低(P<0.001);经肉桂水提物(200、400、800μg/mL)干预48 h能够剂量依赖性的诱导人肝癌Bel7402细胞凋亡,其细胞凋亡率分别为(16.49±1.88,29.76±1.80,53.27±2.28)。以上实验结果揭示,肉桂水提物能够抑制人肝癌Bel7402细胞增殖并促进Bel7402细胞凋亡,这可能与其能够阻滞Bel7402细胞周期和调节凋亡蛋白表达有关。第二章:为研究体内肿瘤血管的变化,本章以转基因斑马鱼为模型,使用DiO染料对细胞进行染色,采用显微注射技术,构建荷瘤斑马鱼模型。为后续观察体内肿瘤生长和肿瘤诱导的肠下血管生长提供依据。第三章:以荷瘤转基因斑马鱼为动物模型,检测不同浓度肉桂水提物(200、400、800 μg/mL)作用后,荷瘤转基因斑马鱼体内肿瘤和肿瘤诱导的肠下血管的生长情况。实验结果显示,200-800 μg/mL的肉桂水提物溶液均对体内肿瘤的生长和荷瘤斑马鱼的肠下血管均具有抑制作用,并均呈浓度依赖性。本研究表明肉桂水提物对体内外肝癌细胞均具有抑制作用,这可能与肉桂水提物能阻滞细胞周期、促进细胞凋亡、抑制肿瘤新生血管的生成有关。本研究为肉桂在肝癌治疗的研究上提供了一定的理论基础。