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背景:肺癌是我国癌症死亡的主要原因之一,它的发生是复杂的内、外因素共同作用的结果,对其发病机制研究较多的是基因方面。但近年来有人提出了免疫系统的“危险模式”理论,认为免疫系统只是识别“危险信号”而不是“非己信号”。肿瘤在其发生、发展过程中产生足够的“危险信号”,通过相应受体(如Toll-like receptor)的识别从而引起针对异体或自体抗原的免疫反应。其中研究发现由TLR诱导的信号转导通路在肿瘤形成过程中起着重要作用,如TLR表达的上调与胃癌、肠癌等发生、发展有密切关系。另一方面,TLR这种新的生物学特性,也使将免疫佐剂(提供“危险信号”)应用于抗肿瘤免疫治疗成为了可能。Toll样受体(Toll like-receptor,TLR)属于高度保守的Ⅰ型跨膜蛋白,能识别病原相关分子模式,通过MyD88 (myeloid differentiation factor 88)核因子κB等多条信号途径,启动细胞活化进程,上调主要组织相容性复合物和共刺激分子表达,分泌细胞因子等,从而进一步诱导炎症反应。TLR4与TLR9是目前发现与肿瘤发病关系最密切的TLR家族成员,但其是否在肺癌的发病中起作用尚有待研究。目的:从蛋白和mRNA水平研究TLR4和TLR9在肺癌组织和远癌旁正常肺组织中的表达情况,分析二者与肺癌病理分型、淋巴结转移、临床分期和肿瘤细胞分化程度等临床病理资料的相关性,探讨其与肺癌的发生、发展及临床特征之间的关系。方法:本研究采用免疫组化染色法检测TLR4和TLR9蛋白在60例肺癌及20例远癌旁正常肺组织(均为手术切除存档蜡块)中的表达情况。同时,我们收集了24例新鲜肺癌组织及相应的远癌旁正常肺组织标本,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测在肺癌组织及远癌旁正常组织中TLR4mRNA和TLR9mRNA的表达情况及用免疫印迹法(Western blotting)进一步验证TLR4和TLR9蛋白的表达。所有标本均经病理证实为肺癌或正常肺组织。结果:TLR4和TLR9在60例肺癌组织中均有不同程度的表达:TLR4阳性率分别为50%(30/60),TLR9阳性率分别为86.7%(52/60),均显著高于20例远癌旁正常肺组织中的10%(2/20)和15%(3/20)(P<0.05)。肺癌组织中TLR4和TLR9蛋白的表达与患者的年龄、性别、吸烟、组织类型、TNM分期和淋巴结转移均无明显相关性(P>0.05),但其中TLR4的表达与肿瘤细胞的分化程度密切相关(P<0.05),且TLR4和TLR9之间的表达呈正相关(P<0.05)。在24例新鲜标本中,用Western blotting方法进一步证实了在肺癌组织上存在TLR4和TLR9的表达,且明显高于远癌旁正常肺组织。同时,我们用RT-PCR方法检测TLR4mRNA与TLR9mRNA在肺癌组织和远癌旁正常肺组织中的表达情况,结果发现TLR4mRNA与TLR9mRNA在肺癌组织中的表达明显高于远癌旁正常肺组织。结论:TLR4和TLR9在肺癌组织中的表达明显高于远癌旁正常肺组织,且TLR4的表达与肿瘤细胞的分化程度有关,恶性度越高,TLR4的表达就越高,提示二者可能参与肺癌的发生、发展过程,且TLR4与肿瘤的恶性度有一定的关系,这将为肺癌发病机制的研究提供新的思路。