铜锌离子富集与释放对蚂蟥生长免疫、药材品质影响的研究

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蚂蟥(Whitmania pigra Whitman)为《中国药典》(2015年版)药材水蛭的基原动物之一,其干燥全体具有破血消症、逐瘀通经的功效,是众多治疗心血管疾病中成药的主要原料。由于受环境、市场需求大等因素影响,导致野生蚂蟥濒临灭绝。近十年来对蚂蟥呼吸和消化生理、摄食规律、养殖密度及投喂频率等方面做了大量研究工作,在此基础上,蚂蟥人工养殖基本获得成功。在动物养殖过程中,环境、饲料等众多环节中所含重金属在动物体内聚集是影响其品质和生长的一个重要因素。本实验拟探究Cu2+、Zn2+对蚂蟥急性毒性实验、在生理与分子上对蚂蟥生长免疫、药材品质影响及在其体内富集与释放规律的机理。研究结果如下:
  (1)通过静水停食实验法探究Cu2+、Zn2+两种重金属离子对蚂蟥急性毒性效应。
  结果表明:Cu2+、Zn2+对蚂蟥96h的半致死浓度依次为0.194mg·L-1、8.113mg·L-1,蚂蟥对Cu2+、Zn2+的安全浓度分别为0.019mg·L-1、0.811mg·L-1,两种重金属在同浓度下对蚂蟥的毒性大小为Cu2+>Zn2+,蚂蟥中毒时表现为游动加快、身体扭曲翻滚、畸形、头部有出血点等症状。
  (2)在富集初期40天内Cu2+、Zn2+蚂蟥特定生长率显著高于对照组(P<0.05),死亡率低于对照组,消化酶活性显著高于对照组(P<0.05),免疫酶与对照组比呈现先显著高于对照组后差异降低的趋势(P<0.05)。释放期时无明显差异。Cu2、Zn2+对蚂蟥内在品质无显著性影响。
  (3)蚂蟥不同组织对Cu2+富集能力为消化道>肌肉>皮肤,对Cu2+释放能力为肌肉>消化道>皮肤;不同组织对Zn2+富集能力为肌肉>消化道>皮肤,对212+释放能力为皮肤>消化道>肌肉。蚂蟥分别在30与40天能将体内富集的Cu2+与Zn2+释放完毕。
  (4)离子富集初期40天内Cu2+、Zn2+组蚂蟥生长相关基因GH、IGF-1与消化酶相关基因α-GLU、ATGL、PT表达量显著高于对照组(P<0.05),免疫酶基因SOD、CAT、AKP表达量与对照组比呈现先显著高于对照组后差异降低的趋势(P<0.05),Hirudin基因表达量与对照组无显著差异(P>0.05)。综上,Cu2+、Zn2+能通过影响相关基因表达量来提高蚂蟥消化酶、抗逆酶活性,促进蚂蟥生长、提高免疫能力,但并不影响药材水蛭内在品质。
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