家蝇(Musca domestica)是一种全球广布性常见双翅目昆虫,其生存环境常常滋生大量的病原微生物,长期的进化使家蝇拥有了强大的先天性免疫系统。因此家蝇也逐渐成为人们研究先天性免疫的良好模型。在本研究中我们以家蝇为研究对象,通过家蝇转录组数据筛选出了TRAF6的同源基因MdTRAF6,其表达受细菌刺激后上调,我们推测它可能参与了家蝇的抗菌免疫反应。为了进一步验证MdTRAF6在家蝇先天性免疫中的作用,我们检测了免疫刺激后MdTRAF6的表达量变化,并且检测了干扰MdTRAF6后抗菌肽以及相应转录因子的表达量变化。同时我们意外发现利用RNAi方法敲低成蝇体内MdTRAF6基因表达后,家蝇的产卵量及幼虫存活率均受到明显影响。另外本研究构建了MdTRAF6基因亚细胞定位表达载体并转染到SF9细胞中,分析MdTRAF6在细胞中的分布情况。实验研究结果如下:1.qPCR及Western blot显示MdTRAF6在幼虫不同组织中均有分布,在肠道中表达量最高,脂肪体次之,血细胞中表达量最低。2.细菌攻毒实验表明MdTRAF6在细菌刺后表达量显著上调。3.RNAi干扰家蝇幼虫中MdTRAF6的表达后,抗菌肽Cecropin的表达量显著上调,Muscin、Attacin的表达量与对照组相比显著下调,而Diptericin的表达量虽然呈现下调趋势但是没有显著性。相关通路上转录因子的检测结果发现Relish的表达量上调,Dorsal表达量下调,JNK表达量没有显著性。4.MdTRAF6在家蝇不同发育阶段的表达量不同,在整个幼虫阶段表达量相对较稳定,呈低水平表达,在蛹和成虫期表达量最高。5.在成蝇阶段干扰MdTRAF6基因表达会使得雌蝇累计产卵量与对照组相比明显降低,同时子一代幼虫的存活率也明显降低。6.在SF9细胞中对MdTRAF6进行亚细胞定位,结果显示家蝇中TRAF6基因主要分布在细胞质中。