慢性乙肝病毒携带者孕妇血清HBV DNA载量及其基因分型初步研究

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目的:1.研究慢性乙肝病毒携带者(AsC)孕妇血清HBV DNA载量及HBV基因型分布情况;2.研究HBe Ag阳性HBe Ag阴性慢性AsC孕妇血清HBV DNA载量之间的差异,为慢性乙肝病毒携带者孕妇孕期保健个体化方案的制定及HBV母婴垂直传播的防治提供实验依据。方法:1.根据慢性AsC孕妇和非乙肝孕妇纳入标准,收集2016年9月至2018年1月于郴州市第一人民医院中心医院产科门诊就诊151例慢性AsC孕妇和141例非乙肝孕妇作为研究对象,慢性AsC孕妇根据乙肝血清学检查结果,可分为HBe Ag阴性慢性AsC孕妇和HBe Ag阳性慢性AsC孕妇。2.采用紫外-乳酸脱氢酶法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、苹果酸脱氢酶法检测血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、亚铁嗪法检测血清铁(Fe)、比浊法检测血清铁蛋白(Fet),采用时间分辨免疫荧光法检测研究对象血清乙肝表面抗原(HBs Ag)、乙肝表面抗体(HBs Ab)、乙肝e抗原(HBe Ag)、乙肝e抗体(HBe Ab)和乙肝核心抗体(HBc Ab)。3.采用实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)法检测血清HBV DNA载量。4.采用巢式PCR扩增样本的HBV前C/BCP区基因,PCR产物测序后,再进行Blast比对、HBV基因分型。5.采用GraphPad Prism 7.00对实验结果进行统计学分析。结果:1.慢性AsC孕妇组血清Fe、Fet水平[17.20(9.30,23.20)μmol/L、36.40(12.20,92.50)μg/L]均高于非乙肝孕妇组[14.30(9.15,18.40)μmol/L、17.60(7.30,31.50)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05、P<0.05)。2.HBe Ag阳性慢性AsC孕妇组血清log10 HBV DNA载量水平7.86(7.31,8.21)IU/m L高于HBe Ag阴性慢性AsC孕妇组3.41(2.92,4.11)IU/m L,差异有统计学意义(P<0.05)。3.151例慢性AsC孕妇中,PCR扩增、测序和HBV基因分型成功86例,B型占87.21%(75/86),C型占12.79%(11/86),未发现其他基因型。4.HBV基因型B型慢性AsC孕妇在高、低HBV DNA载量组分别占69.33%(52/75)、30.67%(23/75),HBV基因型C型慢性AsC孕妇在高、低HBV DNA载量组分别占81.82%(9/11)、18.18%(2/11),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:慢性AsC孕妇血清HBV DNA载量水平较高,HBV基因型以B型为主,HBe Ag阳性慢性AsC孕妇血清HBV DNA载量比HBe Ag阴性慢性As C孕妇高,临床需密切关注慢性AsC孕妇血清HBV DNA载量和乙肝血清学指标,减少HBV母婴垂直传播。
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