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LKB1/AMPK信号通路广泛参与机体细胞的增殖、分化和凋亡等生理活动,调控能量代谢等生命活动。而LKB1基因作为AMPK上游关键基因之一,其突变或者失活会引起AMPK信号通路变化,由此导致人类胃肠道疾病发生。因此，本试验旨在研究LKB1/AMPK信号通路内信号因子在家兔非特异性肠炎中的表达差异和作用机制,从而为家兔非特异性肠炎治疗和预防提供理论依据。试验前期克隆LKB1基因并通过构建低纤维日粮诱导家免非特异性肠炎模型,采用RT-qPCR法检测LKB1、AMPK (PRKAA2)、mTOR和NF-κβ基因在健康正常组(30只)和低纤维诱导肠炎组(60只)中7个组织(十二指肠、圆小囊、空肠、回肠、结肠、肝脏和脾脏)的mRNA表达量。试验后期通过培养家兔结肠上皮细胞(CEC)以及利用LPS构建家兔CEC炎症模型，采用RNAi技术干扰炎症细胞中LKB1基因的表达,然后通过RT-qPCR法检测LKB1、PRKAA2、NUAK1、mTOR、NF-κβ、IL-1A、TNF-α、PGC-1α和ATG13基因在不同炎症细胞组中mRNA表达量,由此分析LKB1/AMPK信号通路在家兔非特异性肠炎中的作用机制。主要结果如下：1、克隆得到家兔LKB1基因的CDS全序列(GenBank登录号为KT439400)。CDS区全长分别为1317 bp,编码氨基酸数为438。家兔LKB1基因核苷酸序列与人、鼠兔和沟鼠同源基因序列一致性分别为87.85%、89.98%和85.42%,表明LKB1基因在物种间进化高度保守。2、检测LKB1、AMPK、mTOR和NF-κβ基因在家兔低纤维日粮诱导非特异性肠炎模型中7个不同组织样本中的表达差异,结果表明在肠炎组的肝脏组织中LKB1表达量升高,其中mTOR基因表达量极显著升高,并与炎症因子NF-κβ呈负相关。在肠炎组的小肠的三个组织中LKB1、PRKAA2、NF-κβ与mTOR呈负相关,其中在十二指肠中LKB1基因表达与NF-κβ表达呈正相关,mTOR极显著升高,并与NF-κβ表达呈负相关。而在肠炎组免疫组织(圆小囊和脾脏)中LKB1、PRKAA2、mTOR均与炎症因子NF-κβ表达呈负相关。3、复苏和培养已分离纯化的CEC细胞后,当添加LPS终浓度为1000ng/ml时,成功构建了家兔结肠炎症细胞(CEC)炎症模型。4、利用RNAi技术干扰炎症CEC中LKB1基因的表达,成功筛选出能够沉默LKB1基因表达的si-02-LKB1,沉默效率达90.7%。5、检测炎症细胞组模型(转染si-02-LKB1炎症细胞组和未转染siRNA炎症细胞组)中LKB1/AMPK信号通路相关信号因子的表达差异,结果表明干扰LKB1基因表达后,引起AMPK信号通路下游基因AMPK(PRKAA2)、mTOR、PGC-1α和ATG13表达量在不同时段升高,而AMPK(NUAK1)、IL-1A和TNF-α下降。由此表明LKB1基因通过AMPK信号通路相关信号因子影响炎症因子表达。本试验通过克隆家兔LKB1基因和研究LKB1/AMPK信号通路下游基因对家兔非特异性肠炎的影响,结果表明LKB1基因通过AMPK信号通路对家兔肠炎起调节作用,LKB1表达量降低会缓解家兔非特异性肠炎的炎症反应,可作为影响家兔肠炎发病的重要候选基因,以此为家兔抗病育种提供理论依据。