植物提取物及挥发油抑制1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(DXR)的研究

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由细菌等微生物产生的主要用于细菌感染性疾病治疗的次级代谢产物或人工合成类似物,被称为抗生素,它是目前临床中使用最广泛的药物。抗生素的应用极大地降低了感染性疾病的死亡率。但是由于抗生素的滥用,致抗生素敏感型菌株大量死亡,耐药性菌株肆意繁殖,抗生素临床疗效不断降低。目前,寻找新型抗生素成为医药领域最大的挑战之一。发现新的作用靶标,开发高效、安全的抗生素,有着非常重要的现实意义。萜类化合物在自然界分布广泛,并且有着不可取代的多种生物活性。上世纪末科学家发现了2-甲基-D-赤藻糖醇-4-磷酸途径(MEP pathway),这是萜类化合物的新生物合成途径。通过研究发现,MEP途径存在于大部分病原微生物中,而不存在于人体内。因此,该途径中的相关酶就成为新抗生素筛选的靶标。其中,在MEP途径担任关键限速酶的1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(DXR),催化1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸(DXP)转化为2-甲基-D-赤藻糖醇-4-磷酸(MEP),被认为是最有应用前景的新抗菌素筛选靶标。因此,寻找DXR的抑制剂具有重要的意义。研究表明,许多植物提取物以及挥发油具有良好的抗菌效果。在本课题中,我们首先提取并初步分离了莲子等22种已被报道具有抗菌活性的植物,同时提取香樟等12种植物的挥发油,另外还通过其它途径获得了丁香油等27种挥发油。其次,我们利用已有的HPLC检测法,及新建立的UV检测法,检测了各提取物、挥发油对大肠杆菌DXR(EcDXR)的抑制活性,最终发现植物提取物中石榴籽乙酸乙酯层(29.86%)、石榴籽水层(52.29%)、香蕉皮乙酸乙酯层(32.01%)、核桃青皮石油醚层(41.43%)、核桃青皮正丁醇层(29.03%)、葡萄皮水层(39.02%)、莲蓬水层(41.07%)以及青桔水层(68.23%)对DXR的抑制作用较强;挥发油中柚子皮(84.40%)、荆芥油(73.14%)、花椒油(65.30%)抑制活性较好;荆芥挥发油分段中第7段(51.24%)、第28段(75.42%)及第30段(58.81%)抑制活性较优(以上活性测定时植物提取物终浓度均为lmg/mL)。基于以上实验结果,本文提出一种假设,认为极性偏大化合物具有较优抗DXR活性。
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