【摘 要】
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本文研究了中草药知母中总皂甙的提取、纯化与测定方法,同时对知母总皂甙清除羟自由基的能力进行了初步探讨。 (1)以总皂甙元的得率为检测指标,首次采用超声提取法,并通过
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本文研究了中草药知母中总皂甙的提取、纯化与测定方法,同时对知母总皂甙清除羟自由基的能力进行了初步探讨。
(1)以总皂甙元的得率为检测指标,首次采用超声提取法,并通过单因素实验以及正交实验,确定了最佳提取工艺,知母总皂甙元得率达32.5mg/g。
(2)以总皂甙的含量为检测指标,采用高速离心一萃取分离进行一次纯化、大孔树脂柱层析进行二次纯化,通过单因素实验建立了最佳纯化工艺,所得知母总皂甙纯度达91.0%。
(3)以菝葜皂甙元的水解产率为检测指标,采用酸水解法,通过单因素实验建立了最佳水解工艺,所得水解产物粗皂甙元样品中总皂甙元的含量达86.8%,菝葜皂甙元的含量达57.4%。
(4)采用紫外分光光度法测定知母总皂甙元的含量,确定了最佳测定条件,菝葜皂甙元的浓度在8.4×10<-3>~5.04×10<-2>mg·mL<-1>之间线性关系良好。
(5)建立了以乙腈一水(55:45)为流动相的HPLC法测定菝葜皂甙元的含量的方法,菝葜皂甙元的浓度在25.2~67.4 μg·mL<-1>之间线性关系良好。
(6)利用Fenton反应产生·OH,并加入溴邻苯三酚红(BPR)显色剂,使BPR的颜色发生变化,测定其吸光度值的变化,可间接测定·OH含量的方法,来对知母总皂甙清除羟自由基的能力进行评价,发现知母皂甙是一种很好的活性羟自由基清除剂,证实了知母皂甙具有抗衰老的作用。
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