应用Real-time PCR研究氟保护漆对儿童唾液变形链球菌影响的定量分析

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目的:应用实时荧光定量PCR来研究新型氟保护漆对儿童唾液中变形链球菌数量的变化,从微生态角度来探讨其防龋效果。方法:随机选取某幼儿园26名适龄儿童,平均年龄为5岁,按龋失补牙面数(dmfs),分为有龋组(dmfs≥1)和无龋组(dmfs=0)各13名。按涂氟操作标准对两组分别进行氟保护漆即多乐氟(Duraphat?)的涂布,并收集涂氟前及涂氟后第1小时、第1周、第2周、第3周、第4周、第8周、第12周的唾液,用细菌基因组DNA提取试剂盒(离心柱法)提取唾液中革兰氏阳性菌基因组DNA和标准菌株变形链球菌基因组DNA,通过实时荧光定量PCR(绝对定量)检测各时间节点变形链球菌的数量,使用中位数表示变形链球菌菌落计数。用统计软件SPSS17.0进行数据处理,采用Mann-Whitney U检验比较有龋组与无龋组涂氟前变链数量的差异,以及涂氟后两组各时间节点变链数量的差异与变化,以P<0.05表明差异具有统计学意义,并对其变化趋势进行分析。结果:未采取涂氟措施前,两组唾液中的变形链球菌数量存在统计学差异(P<0.05)。有龋组涂氟后变形链球菌数量与涂氟前相比呈明显下降趋势,且在第8周和12周有统计学意义(P<0.05);无龋组在涂氟前后变形链球菌数量无明显变化(P>0.05)。结论:多乐氟能显著降低有龋儿童唾液中变形链球菌的数量,且抑菌效果持续时间较长,对龋易感儿童的防龋效果好,适合作为儿童防龋措施进行推广。
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