黄芩素抑制宫颈癌Hela细胞增殖作用机制的初步研究

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[目的]观察不同浓度黄芩素干预宫颈癌Hela细胞后,细胞周期、细胞迁移、细胞培养基中基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP2)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase,MMP9)活性的变化,以及MMP2、MMP9、基质金属蛋白酶组织抑制剂2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase2,TIMP2)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)mRNA和蛋白表达水平的变化。[方法]体外培养宫颈癌Hela细胞,分空白对照(Control)组、(50,100,200,300)μmol/L干预组,培养(12,24,48)h。相差显微镜下观察细胞形态及数量的变化;流式细胞技术法检测细胞周期的变化;细胞迁移实验观察细胞迁移的改变;明胶酶谱法检测细胞培养基中的MMP2、MMP9活性变化;RT-PCR检测MMP2、MMP9、TIMP2、CyclinD1mRNA表达水平的变化;Western Blot检测MMP2、MMP9、TIMP2、CyclinD1蛋白表达水平的变化。[结果]黄芩素干预24小时后,与空白对照组相比较,各黄芩素干预组的细胞G1期均受阻滞,阻滞程度与黄芩素干预浓度成正向变化;黄芩素能有效抑制Hela细胞的迁移,迁移距离与黄芩素干预浓度成反向变化;细胞培养基中MMP2及MMP9的活性受抑制,抑制程度与黄芩素干预浓度成正向变化;MMP2、MMP9、CyclinD1mRNA及蛋白表达随黄芩素干预浓度增加,呈逐渐降低的趋势(P<0.05,P<0.01), TIMP2mRNA及蛋白水平表达随黄芩素浓度增加而逐渐增强(P<0.05,P<0.01)。[结论]黄芩素可有效抑制宫颈癌Hela细胞的迁移,阻滞细胞周期中G1期、降低MMP2、MMP9活性、上调TIMP2及下调MMP2、MMP9、CyclinD1的表达,发挥抑制宫颈癌Hela细胞增殖的作用。
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