目的采用高脂饲料诱导的方法,建立和比较三种不同品系、不同性别小鼠肥胖模型,筛选出一种造模周期相对较短并且具备典型肥胖特征的小鼠肥胖模型,运用酶学、分子生物学和免疫学技术,探讨该肥胖模型形成的分子机制,为减肥新药药效及作用机制研究选择动物模型时提供参考依据。同时根据上述筛选结果,选择C57BL/6J小鼠肥胖模型,评价LRTG的减肥药效,并应用分子生物学等技术探讨LRTG减肥的分子作用机制和作用靶点。方法选用C57BL/6J、ICR和KM三个品系小鼠雌雄各半,随机分为正常对照组和高脂模型组,正常组动物饲喂常规饲料,高脂组动物饲喂高脂饲料。分别在饲养4周与8周后测定小鼠体重、脂肪重量、Lee’s指数；观察脂肪细胞形态学并对脂肪细胞横截面面积进行计量；酶法检测血脂水平(TC、TG、FFA)及血清LPL活性；荧光实时定量PCR技术检测肝脏PPARα、脂肪组织PPARγ、DGAT、HSL、ATGL和TGH mRNA的相对表达变化。将C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常对照、高脂模型、阳性对照组(Orlistat120mg/kg)、LRTG高剂量组(1.2g/kg)、LRTG中剂量组(0.6g/kg)、LRTG低剂量组(0.3g/kg)。正常对照组动物饲喂常规饲料,高脂模型及各给药组动物饲喂高脂饲料,建立肥胖动物模型。造模4周后,取正常对照组及高脂模型组动物各一半,测定小鼠体重、脂肪重量、Lee’s指数；酶法检测血脂水平(TC、TG、FFA)确认肥胖模型是否形成。在肥胖模型成立的基础上开始给药,各组按剂量灌胃给药,模型组和对照组灌胃等体积蒸馏水。连续给药5周后,通过测定小鼠体重、脂肪重量、Lee’s指数、检测血脂水平(TC、TG、FFA),观察脂肪细胞形态学和脂肪细胞横截面面积计量来评价LRTG的减肥作用。运用实时定量PCR技术对脂肪代谢和胆固醇代谢通路的关键基因进行筛选,探讨LRTG减肥的分子作用机制,确认作用靶点。结果经高脂饲料诱导4周时,C57BL/6J模型组小鼠体重、脂肪重量、Lee’s指数与对照组比较均明显升高,脂肪细胞体积明显增大,其肥胖指标、肥胖特征较ICR和KM品系小鼠明显,造模8周时上述肥胖指标一直维持在高水平状态,说明C57BL/6J小鼠较其它品系小鼠更易于形成肥胖模型。肥胖模型机制研究表明,C57BL/6J小鼠在高脂饲料诱导下,肝脏PPARα和脂肪PPARγ表达上调,使下游靶酶LPL活性升高,促进血液中TG分解为FFA,进而被脂肪组织大量摄取；同时脂肪组织DGAT表达上调,使TG重新合成并贮存于脂肪组织中；脂肪组织ATGL、HSL及TGH三种脂肪分解酶表达下调,使脂肪的分解受到抑制,造成脂肪堆积,这些因素共同作用导致肥胖。LRTG减肥药效学研究结果表明,连续给药5周后,阳性药Orlistat和LRTG均可明显降低肥胖小鼠体重、脂肪重量、Lee’s指数,减小脂肪细胞体积,并可降低血清TC水平。实时定量PCR技术对脂肪代谢通路关键基因的筛选结果显示,LRTG可使脂肪组织Lep表达明显提高,从而使下游靶酶DGAT表达下调,使脂肪组织TG合成受到抑制,最终导致脂肪重量减轻,脂肪沉积减少。同时LRTG可使肝脏CYP7A1表达明显上调,从而使TC转化成胆汁酸清除出体外,改善由肥胖导致的胆固醇代谢紊乱。结论经高脂饲料诱导后,C57BL/6J品系小鼠与ICR和KM品系小鼠比较,具有肥胖造模周期较短、指标稳定、可重复性强、肥胖特征明显等特点,更易于形成肥胖模型。血清LPL活性、肝脏PPARα、脂肪组织PPARγ、DGAT、HSL、ATGL和TGH表达的改变是其肥胖形成的主要分子机制。LRTG连续灌胃给药5周,可明显减轻C57BL/6J肥胖小鼠体重、脂肪重量、Lee’s指数,减小脂肪细胞体积,并可明显改善由肥胖导致的胆固醇代谢紊乱,脂肪组织DGAT、Lep、肝脏CYP7A1表达的改变是LRTG减肥和降脂作用的主要分子机制及作用靶点。