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在干旱逆境胁迫下,光合作用的聚光色素吸收的光能不能完全用于碳同化,会出现光能过剩,产生活性氧自由基(ROS),破坏光合机构,形成了光氧化甚至光破坏。植物在长期的自然进化中会构建一系列的光破坏防御机制,但是这种自我调节功能在一定程度上是有限的。人们发现在陆地棉种子胚胎发育的晚期存在一类具有亲水性蛋白,称为植物胚胎发育晚期丰富蛋白(late embryogenesis abundant proteins,LEA)。在干旱胁迫下,LEA蛋白在细胞中类似于植物渗透调节物质一样,可增加细胞内的水分含量或避免水分的散失,保护植物细胞的脱水伤害,维系植物的代谢功能。但是有关LEA蛋白在植物受到干旱胁迫时,保护植物叶绿体进行光合作用方面的研究,尤其是光破坏防御方面的研究,鲜见报道。为此,本论文从西伯利亚蓼的叶片中克隆了LEA蛋白基因(ps-LEA),遗传转化到烟草中。从卡那霉素检测阳性植株中,经过PCR的筛选获得阳性的转化植株。对遗传转化烟草植株幼苗施以干旱处理,以野生烟草“龙江911”为对照(CK),通过对光合电子流分配、过剩光能的耗散和光合能量分配等研究,以揭示ps-LEA在植物叶绿体光破坏防御中的作用。 研究结果表明:土壤干旱和PEG模拟干旱抑制了野生烟草(CK)的地上和地下部生长,从而降低了植株的生物量,表现为叶片的净光合速率(Pn)在干旱胁迫下降低明显,进一步发现光合降低的主要原因是由于叶片的最大光化学效率(Fv/Fm)和光合电子传递速率(ETR)降低,出现了明显的光抑制现象。但是土壤干旱和PEG模拟干旱试验中,转ps-LEA基因烟草叶片的Pn、Fv/Fm和ETR降低的程度比CK降低的小,轻度干旱时Fv/Fm变化不大,说明ps-LEA在干旱胁迫时发生了重要作用。进一步检测光化学指标发现,由于ps-LEA基因的存在,形成了亲水性蛋白(可溶性蛋白含量增加),防止了细胞脱水,保护了光合机构免受伤害,主要表现在ps-LEA基因减少了PSⅡ反应中心与光能吸收和电子传递相关的蛋白复合体的降解,增加剩余活性反应中心的开放程度,维持了电子传递过程的相对稳定性,同时在ps-LEA基因还增加了叶片捕获光能比例、吸收光能用于电子传递的能量,提高PSⅡ热耗散能力减轻干旱胁迫带来的伤害,有效地提高了植物的抗旱能力。