目的：采集灵芝药材及其配方颗粒的指纹图谱，并测定二者中麦角甾醇的含量，为制定灵芝配方颗粒的质量标准提供科学的依据和方法。　　方法：HPLC法建立指纹图谱：分析用色谱柱为Shim-pack VP-ODS C18（5μm，4.6×150mm）柱，保护柱为菲罗门C18（4×3mm），以乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱，流速为1.0mL/min，柱温为35℃，检测波长为250nm；HPLC法测定麦角甾醇的含量：分析用色谱柱为Shim-pack VP-ODS C18（5μm，4.6×150mm）柱，保护柱为菲罗门C18（4×3mm），以甲醇﹕水（99﹕1）为流动相，流速为1.2mL/min，柱温为25℃，检测波长为281nm。　　结果：HPLC法建立指纹图谱：以灵芝酸A为参照物，建立了灵芝药材及其配方颗粒的HPLC指纹图谱的测定方法，重复性和精密度良好，标示出灵芝药材16个共有峰，其配方颗粒有18个共有峰，生成灵芝药材及其配方颗粒对照指纹图谱共有模式；HPLC法测定麦角甾醇的含量：麦角甾醇对照品进样量在0.2237～1.342μg之间与峰面积值呈良好线性关系，回归方程为y=1104.5x+1.168，r=0.9999，回收率为100.3%，RSD为0.49%（n=6）。　　结论：本研究建立的灵芝药材及其配方颗粒的HPLC对照指纹图谱，为生产中控制产品质量提供一个参照依据。通过比较不同产地灵芝药材及其配方颗粒中麦角甾醇含量，得出各批灵芝药材中麦角甾醇含量相差比较大，其中紫芝含量最低，其配方颗粒中麦角甾醇含量相差也比较大。所建立的HPLC法测定麦角甾醇含量灵敏度高，重现性好，能准确快速地进行测定。