乳腺癌是引起人类死亡的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率在女性癌症中位居前列,因此研究乳腺癌的治疗方法对全球女性健康具有重要意义。化学疗法,尤其靶向药物治疗是目前临床上治疗乳腺癌最有效的方法之一,但是靶向药物治疗也面临着患者局限性和治疗耐药性等问题。因此,可以通过研发新的抗癌药物来解决乳腺癌的治疗问题,而小分子药物因具有易提纯,高效性,靶向性等优点一直是人们研究的热点。本论文重点开展了对小分子化合物VP384抗乳腺癌作用的研究。我们首先对8种小分子化合物VP336、VP359、VP362、VP371、VP382、VP384、VP390和VP396的抗肿瘤效果进行了初步探究,结果显示VP384能明显降低乳腺癌细胞的活性,且对正常细胞的毒性较小,表明VP384具有良好的抗乳腺癌活性。我们进一步探究了VP384抗乳腺癌作用的机制,用PI-Annexin V结合流式细胞术检测凋亡,发现VP384能明显增加乳腺癌细胞凋亡的比例,用Caspase的广谱性抑制剂Z-VAD-FMK抑制凋亡可以明显拯救细胞死亡;Western blot检测自噬标志性蛋白LC3的表达水平,结果表明VP384诱导乳腺癌细胞发生自噬,但用3-MA、CQ抑制自噬并不能拯救细胞死亡,说明VP384同时诱导乳腺癌细胞发生凋亡和自噬,且凋亡是VP384诱导乳腺癌细胞死亡的方式,而自噬并未参与到VP384诱导的细胞死亡中。分子机制的研究结果表明,VP384诱导细胞内ROS水平升高,用ROS的清除剂NAC清除ROS可以拯救细胞死亡,说明VP384通过激活乳腺癌细胞内的ROS诱导细胞死亡。信号通路研究发现VP384促进乳腺癌细胞内促凋亡蛋白Bim的表达,敲低细胞内的Bim后能够减少细胞凋亡,拯救细胞死亡。进一步研究发现VP384还抑制了乳腺癌细胞内Akt的表达以及活性,用Akt的激活剂SC79激活Akt或过表达持续激活型的Akt后,Bim表达受到抑制,细胞凋亡减少,从而拯救VP384诱导的细胞死亡,说明Akt-Bim信号通路参与了VP384的抗乳腺癌作用。此外VP384还促进c-Myc的表达,敲低细胞内c-Myc或用c-Myc的抑制剂10058-F4抑制c-Myc的活性,可以拯救细胞死亡,并使Bim表达下调,抑制细胞凋亡,说明c-Myc通过Bim调控凋亡,参与VP384的抗乳腺癌作用。综上所述,本课题研究表明小分子化合物VP384在体外通过诱导细胞凋亡导致乳腺癌细胞死亡,并对正常细胞毒副作用较小,因此具有良好的抗乳腺癌潜在功效。分子机制研究表明,VP384通过激活ROS、c-Myc信号通路以及抑制Akt信号通路诱导乳腺癌细胞死亡。本研究从8种新合成的小分子化合物中发现VP384具有较强抗乳腺癌效果,为临床上乳腺癌的治疗提供了新的可能方案,为抗乳腺癌化疗药物的研发提供了新的思路。