β2-肾上腺素能受体(β2-AR)是细胞表面受体的一种，它能通过偶联异源三聚体G蛋白将信号转导引入到细胞内部，参与机体的许多生理和病理过程，是某些药物作用的主要靶标。利用β2-AR与药物有效成分特异性结合的能力，可以对药物中的活性成分进行有效的筛选，而获取高纯度的β2-AR是整个受体筛药的前提。　　 在前期克隆和表达β2-AR的基础上，本实验建立了一种两步柱色谱分离纯化β2-AR的方法。首先用Ni2+螯合的SepharoseH.P.与含有组氨酸标签的β2-AR特异结合的性质对其进行初步分离，层析缓冲液：A液为20.0mmol/LPB+500.0mmol/LNaCl(pH7.4)，B液为含500.0mmol/L咪唑的A液。用0.0、50.0、250.0和500.0mmol/L咪唑进行分段洗脱后得到三个蛋白峰，经过SDS-PAGE分析，含有β2-AR蛋白的组分中仍然含有杂蛋白。在此基础上，再用QuatemarySepharoseF.F.对其进行进一步分离纯化，层析缓冲液：A液为20.0mmol/LPB(pH7.4)，B液为含有800.0mmol/LNaCl的A液。用A液+18％B液平衡色谱柱后进行线性梯度洗脱，梯度为A液+18％B液到100％B液，总洗脱体积为30mL。最终获得五个蛋白峰，含有β2-AR的组分经SDS-PAGE和高效凝胶排阻色谱检测其纯度约为95％，再经受体-配体结合法检测表明获得的β2-AR具有正常生物活性。结果表明：经过Ni2+螯合的SepharoseH.P.亲和层析与QuaternarySepharoseF.F.强阴离子层析可以对重组β2-AR进行有效分离。