实验目的1、观察前列腺癌中Cx43表达,评价其生物学意义。2、体外观察ATRA是否有提高HSV-TK/GCV对前列腺癌PC-3细胞的旁观者杀伤作用,探讨其作用机理是否与提高Cx43的表达及改善前列腺癌细胞间连接通讯功能有关,为联合应用ATRA和HSV-TK/GCV基因系统治疗前列腺癌提供理论依据。实验方法和结果1通过免疫组化观察15例正常前列腺组织标本,35例前列腺癌组织标本以及体外培养前列腺癌细胞株PC-3中Cx43表达情况。Cx43在所有正常前列腺组织中强表达,主要表达在细胞膜上;而在肿瘤组织中约74.2%表达降低或不表达,Cx43在早期高分化肿瘤中表达降低,且与前列腺癌病理分级呈负相关关系;在PC-3细胞系中表达降低。RT-PCR检测6例正常前列腺组织和6例肿瘤组织及PC-3细胞Cx43mRNA并行半定量分析,Cx43mRNA水平在肿瘤组织和PC-3细胞株中显著降低(p<0.05)2观察全反式维甲酸处理后的PC-3细胞对HSV-TK/GCV杀伤作用的敏感性,把PC-3-TK+和PC-3-TK-细胞按不同比例混合培养,PC-3-TK+阳性细胞占总细胞的比例分别为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0 ,MTT法观测ATRA对TK基因旁观者杀伤作用的影响。结果Ad-TK/GCV系统对PC-3细胞有一定的杀伤作用,旁观者效应在TK+:TK-细胞混合比例为5:5时明显出现;加用ATRT后,在TK+:TK-细胞混合比例为3:7时就明显出现,ATRA明显提高Ad-TK/GCV系统治疗PC-3细胞的旁观者效应,TK+细胞可以减少20%用量。结论前列腺癌中缝隙连接蛋白Cx43表达降低或异常分布,可能是导致细胞间连接通讯功能下降的主要原因,且与肿瘤恶性生物学有密切关系。ATRA可以显著提高HSV-TK对前列腺癌PC-3细胞的旁观者杀伤作用,可能与其促进肿瘤细胞Cx43基因转录,提高蛋白表达,改善细胞间连接通讯功能有关。