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目的研究人脐静脉内皮细胞（HUVEC）与食管癌细胞（EC9706）间基于外泌体的信息交流,以及启膈散对HUVEC外泌体中miR-21的影响,以探讨HUVEC与EC9706共培养条件下EC9706对顺铂的耐药性机制,以及方药启膈散基于外泌体对食管癌EC9706顺铂耐药影响的部分机制。方法1.HUVEC细胞外泌体的提取与鉴定:利用细胞培养技术常规培养HUVEC细胞,收集HUVEC细胞的上清液,以ExoQuick-TC Exosome Isolation Reagent外泌体提取试剂盒提取HUVEC上清中的外泌体,以透射电子显微镜技术观察HUVEC外泌体的大小和形态是否符合外泌体的定义,以Western Blot技术鉴定外泌体的表面标记性蛋白Alix和CD-9的表达情况。2.EC9706细胞对HUVEC外泌体的摄取:提取HUVEC外泌体,利用PKH26染色试剂盒染色外泌体,把染色后的外泌体与EC9706细胞共同培养24h,利用激光共聚焦显微镜观察EC9706细胞对HUVEC分泌的外泌体是否有摄入。3.MTT法检测HUVEC外泌体与EC9706细胞共培养条件下顺铂对EC9706的细胞毒作用:实验分为:单独培养EC9706组、HUVEC外泌体与EC9706共培养组。设置5个顺铂浓度:0μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL、8μg/mL,每个浓度设置3个复孔。以MTT法检测两组细胞的OD值,计算两组细胞对顺铂的IC50值,对比两组顺铂对EC970细胞毒性差异。实验重复3次。4.qRT-PCR技术检测HUVEC细胞外泌体中miR-21表达量:以5%启膈散含药血清与5%对照血清分别培养HUVEC细胞,提取两组细胞外泌体中的RNA,反转录RNA,利用qRT-PCR技术检测两组HUVEC细胞外泌体中miR-21表达量的差异。实验重复3次。结果1.利用外泌体提取试剂盒提取到外泌体白色沉淀,利用透射电子显微镜观察到HUVEC外泌体呈囊泡样结构,其直径大小在30-100nm之间,Western Blot检测到HUVEC外泌体的Alix和CD-9蛋白表达为阳性。2.激光共聚焦显微镜观察到EC9706细胞可摄取HUVEC外泌体。3.HUVEC外泌体与EC9706共培养条件下,EC9706对顺铂的IC50=3.84±0.45μg/mL;单独培养EC9706条件时,EC9706对顺铂的IC50=2.69±0.23μg/mL,两者比较有统计学意义（P<0.05）。4.5%对照血清组HUVEC外泌体的miR-21表达量为1.00±0.00,5%启膈散血清组HUVEC外泌体的miR-21表达量为7.58±2.51。5%启膈散含药血清组HUVEC外泌体的miR-21比5%对照血清组HUVEC外泌体的miR-21表达量明显升高,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论1.EC9706细胞对HUVEC外泌体有摄取作用。2.HUVEC外泌体增加了EC9706对顺铂的耐药。3.5%浓度的启膈散含药血清没有降低共培养条件下EC9706对顺铂的耐药性并且上调了共培养条件下EC9706的miR-21的含量,可能与该浓度下HUVEC外泌体中miR-21高表达,并被EC9706细胞摄取有关。